| 牛抗菌肽Bac7-Bac5-β defense串联基因在昆虫杆状病毒系统中的表达及其产物的活性分析 |
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| 引用本文： | 赵昆,刘思国,王春来,宫强,迟磊,刘建东,王勇,云孟克,刘慧芳,孙延鸣.牛抗菌肽Bac7-Bac5-β defense串联基因在昆虫杆状病毒系统中的表达及其产物的活性分析[J].农业生物技术学报,2008,16(3). |
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| 作者姓名： | 赵昆 刘思国 王春来 宫强 迟磊 刘建东 王勇 云孟克 刘慧芳 孙延鸣 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨,150001;石河子大学动物科技学院,石河子,832003
2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨,150001
3. 石河子大学动物科技学院,石河子,832003 |
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| 摘 要： | 根据GenBank中公布的牛抗菌肽bac7、bat5和βdefense(LAP基因)成熟肽基因序列,人工合成了抗菌肽融合基因Bac7-BacS-β defense,克隆到BAC-TO-BACTM重组杆状病毒表达系统的pFAST HTb载体中,构建了重组转座载体pFASTBac-Bac7-Bac5-βdefense,转化DH10Bac大肠杆菌(Escherichia coli)感受态细胞,PCR方法筛选阳性菌落,抽提大分子质粒DNA,获得重组杆状病毒穿梭载体Bacmid-Bac7-Bac5-βdefense,转染昆虫草地夜蛾(Bombyx mandarina)Sf9细胞出现病变后,收集含有重组病毒颗粒的培养上清,重新感染草地夜蛾St9单层细胞,收集Si9细胞超声破碎,12%SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳可见表达的融合蛋白带,分子量大小为20 kD,表达量约占细胞总蛋白的10.6%.体外抑菌实验表明重组的rBac7-Bac5-βdefense蛋白对大肠杆菌,具有抑菌活性.
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| 关 键 词： | 牛抗菌肽 Bac7、Bac5和β defense融合基因 昆虫杆状病毒表达系统 spodoptera fragiperda 9(Sf9)细胞 重组表达 抑菌活性 牛抗菌肽 Bac7、Bac5和β defense融合基因 昆虫杆状病毒表达系统 spodoptera fragiperda 9(Sf9)细胞 重组表达 |
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