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葡萄金黄化植原体16SrDNA检测与RFLP分析
引用本文:乾义柯,张祥林,马春春,王翀.葡萄金黄化植原体16SrDNA检测与RFLP分析[J].新疆农业科学,2010,47(5):915-920.
作者姓名:乾义柯  张祥林  马春春  王翀
作者单位:新疆出入境检验检疫局,乌鲁木齐,830063;新疆农业大学农学院,乌鲁木齐,830052;新疆出入境检验检疫局,乌鲁木齐,830063;新疆农业大学农学院,乌鲁木齐,830052
基金项目:国家质检总局质检公益性行业科研专项,国家质检总局科研项目 
摘    要:目的]对多种植原体16SrDNA基因序列进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析比较,以期区分葡萄金黄化植原体不同亚种,从而为葡萄金黄化植原体的鉴定提供新依据.方法]用植原体通用引物R16mF2/R16mR1扩增7种不同植原体16SrDNA基因序列,得到约1.5 kb的DNA片段,将此片段克隆到PGM-T载体,并通过酶切鉴定,对重组阳性克隆进行核酸序列测定及同源性分析,利用限制性内切酶XmnⅠ、XspⅠ、TaqⅠ和Rsa Ⅰ对目的片段进行酶切电泳分析.结果]所扩增2个不同亚种的葡萄金黄化植原体D型和C型序列同源性最高,达99.72;,但利用限制性内切酶可以将上述2个亚种从植原体榆树黄化组中区分.结论]利用限制性内切酶分析通用引物R16mF2/R16mR1所扩增的基因片段,可以将葡萄金黄化植原体区分.

关 键 词:葡萄金黄化植原体  16SrDNA  限制性片段长度多态性
收稿时间:2010-05-25
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