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大豆Gm TIP1;1基因的克隆与表达分析
引用本文:张大勇,胡国民,易金鑫,许玲,Ali ZULFIQAR,刘晓庆,袁玲玲,徐照龙,何晓兰,黄益洪,马鸿翔.大豆Gm TIP1;1基因的克隆与表达分析[J].作物学报,2013,39(1):76-83.
作者姓名:张大勇  胡国民  易金鑫  许玲  Ali ZULFIQAR  刘晓庆  袁玲玲  徐照龙  何晓兰  黄益洪  马鸿翔
作者单位:1江苏省农业生物学重点实验室, 江苏省农业科学院农业生物技术研究所, 江苏南京 210014; 2南京农业大学农学院, 江苏南京 210095; 3扬州大学生物科学与技术学院, 江苏扬州225009, 4 Department of Plant Breeding and Genetics, University of Agriculture, Faisalabad 38040, Pakistan
基金项目:本研究由国家自然科学基金项目(31101166, 30971798), 江苏省农业科技自主创新资金[CX(11)2052, CX (10)433], 江苏省自然科学基金(BK2010474)和国家科技支撑计划项目(2011BAD35B06)资助。
摘    要:利用RT-PCR方法从大豆根部组织获得Glyma03g34310.1开放阅读框(ORF)全长, 经测序验证、Blast比对与同源性分析发现该序列编码的蛋白质与其他植物的TIP1;1蛋白具有较高的相似性, 故命名为GmTIP1;1基因(GenBank登录号为AK285481), 该基因ORF长753 bp, 编码1个包含250个氨基酸的蛋白, 在ORF内部第381个核苷酸处含有1个94 bp的内含子, 符合↓GT--AG↓的剪接方式; 系统进化树分析发现Gm TIP1;1聚类到豆科植物分支, 其他不同科的植物也有规律地聚到了不同分支, 推测该蛋白氨基酸序列可以作为植物分类的依据; 半定量RT-PCR结果表明该基因在大豆的不同器官、不同器官的不同发育阶段均具较高且同等的表达水平, 暗示该基因在植物的整个发育进程中均具重要作用; 在盐胁迫的不同时间点其表达量有下降的趋势, 但仍然保持较高的表达水平; 以pYES2为酵母表达载体, 转化酿酒酵母INVSc1菌株, 获得重组酵母INVSc1 (pYES2-GmTIP1;1), 转化菌株在盐胁迫下的存活率明显高于对照INVSc1 (pYES2), 而在干旱胁迫下则没有显著差异, 表明该基因的表达能有效地提高酵母的耐盐性。

关 键 词:Gm  TIP1  1  组织表达  诱导表达  酵母表达
收稿时间:2012-02-21

Isolation and Expression Analysis of Gm TIP1;1 in Soybean (Glycine max L.)
ZHANG Da-Yong,HU Guo-Min,YI Jin-Xin,XU Ling,Ali ZULFIQAR,LIU Xiao-Qing,YUAN Ling-Ling,XU Zhao-Long,HE Xiao-Lan,HUANG Yi-Hong,MA Hong-Xiang.Isolation and Expression Analysis of Gm TIP1;1 in Soybean (Glycine max L.)[J].Acta Agronomica Sinica,2013,39(1):76-83.
Authors:ZHANG Da-Yong  HU Guo-Min  YI Jin-Xin  XU Ling  Ali ZULFIQAR  LIU Xiao-Qing  YUAN Ling-Ling  XU Zhao-Long  HE Xiao-Lan  HUANG Yi-Hong  MA Hong-Xiang
Institution:1.Provincial Key Laboratory of Agrobiology, Institute of Biotechnology, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, Nanjing 210094, China;2.College of Agriculture, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China;3.College of Bioscience and Biotechnology, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China;4.Department of Plant Breeding and Genetics, University of Agriculture, Faisalabad 38040, Pakistan
Abstract:
Keywords:
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