| 农杆菌介导甘蔗基因转化技术的优化 |
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| 引用本文： | 罗敬萍,张树珍,杨本鹏.农杆菌介导甘蔗基因转化技术的优化[J].热带作物学报,2003,24(4):23-28. |
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| 作者姓名： | 罗敬萍 张树珍 杨本鹏 |
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| 作者单位： | 中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室,海口,571101 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(30160045) |
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| 摘 要： | 以甘蔗(Saccharum officinarum L.)品种ROC10为转化受体材料,以GFP基因为报告基因,通过对农杆菌介导遗传转化的一系列条件,包括农杆菌菌株及侵染菌液浓度、侵染时间、受体愈伤组织龄期、AS活化时间及使用浓度、共培养时间等进行优化,同时进行了便于vir基因活化和T-DNA转移的条件组合,如附加果糖和葡萄糖、酸性环境感染,低温共培养等,从而建立了一个可行、有效而又简便的农杆菌介导的甘蔗遗传转化体系。结果表明:农杆菌菌株EHA105优于LBA4404,其适宜侵染浓度D_(600)为1.3752;适宜受体愈伤组织龄期为25℃暗培养25d;适宜侵染时间为30min;适宜AS活化时间为2h,使用浓度为200μmol·L~(-1);适宜共培养时间为4d。获得2株有荧光信号的植株,对这2株植株进行斑点Southern杂交检测,均有阳性反应,证明GFP基因已整合到甘蔗基因组中并得到了有效表达,表明该转化体系确实是有效的。
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| 关 键 词： | 甘蔗 品种 基因转化技术 农杆菌 GFP基因 菌株 侵染菌液浓度 侵染时间 受体愈伤组织龄期 AS活化时间 使用浓度 共培养时间 |
| 修稿时间： | 2002年12月19 |
GFP Gene Transformation of Sugarcane Mediated by Agrobacterium tumefaciens |
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| Lou Jingping Zhang Shuzhen Yang Benpeng.GFP Gene Transformation of Sugarcane Mediated by Agrobacterium tumefaciens[J].Chinese Journal of Tropical Crops,2003,24(4):23-28. |
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| Authors: | Lou Jingping Zhang Shuzhen Yang Benpeng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Agrobacterium tumefaciens GFP gene genetic transformation sugarcane |
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