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洋葱愈伤原生质体分离和纯化研究
引用本文:陈丽,梁毅,汪李平,田保华.洋葱愈伤原生质体分离和纯化研究[J].中国农学通报,2011,27(31):147-151.
作者姓名:陈丽  梁毅  汪李平  田保华
作者单位:1. 北京市农林科学院蔬菜研究中心,北京100097;华中农业大学园艺林学学院,武汉470070
2. 北京市农林科学院蔬菜研究中心,北京,100097
3. 华中农业大学园艺林学学院,武汉,470070
4. 山西大学生命科学与技术学院,太原,030006
基金项目:国家公益性行业科技“葱姜蒜产业发展关键技术研究与开发”(20093018); 北京市常规育种财政专项“蔬菜种质资源的收集保存和评价利用”(2010-509); 北京农林科学院青年科研基金项目“洋葱异源细胞质雄性不育系快速转育技术及育种应用研究”(BAAFS200901)
摘    要:建立高效原生质体分离和植株再生体系是进行体细胞杂交的基础性工作。以洋葱多次继代的愈伤组织为研究试材,对原生质体分离纯化技术进行研究。结果表明:2.0%纤维素酶Onozuka R-10+0.1%果胶酶Y-23+0.5%离析酶 R-10+0.60 mol/L甘露醇+CPW+0.1% MES的酶液,酶解6 h,洋葱原生质体分离效果最好。纯化时,适当降低离心力的短时间离心有利于原生质体纯化过程中产量和活力的保持,以600 r/min离心5 min效果为好。

关 键 词:猪高热病  猪高热病  中药  非特异性免疫力  病毒性疾病  
收稿时间:2011/6/24 0:00:00
修稿时间:2011/10/17 0:00:00

Studies on the Protoplast Isolation and Purification of Allium cepa
Chen Li , Liang Yi , Wang Liping , Tian Baohua.Studies on the Protoplast Isolation and Purification of Allium cepa[J].Chinese Agricultural Science Bulletin,2011,27(31):147-151.
Authors:Chen Li  Liang Yi  Wang Liping  Tian Baohua
Institution:Chen Li 1,2,Liang Yi 1,Wang Liping 2,Tian Baohua 3(1 Research Center for Vegetable,Beijing Agricultural and Forest Academy of Science,Beijing 100097,2 College of Horticulture&Forestry Sciences,Huazhong Agricultural University,Wuhan 470070,3 Life Science and Technical College,Shanxi University,Taiyuan 030006)
Abstract:The basic work for the system establishment about protoplast culture and somatic hybrids is to formulate efficient protoplast isolation and protoplast-culturing system.The conditions of isolation and purification of protoplast from somatic callus of Allium cepa were studied.The results showed that the optimal enzyme solution for protoplast isolation was 2.0% cellulase Onozuka R-10+0.1% pectolgase Y-23+0.5% macerozyme R-10+0.60 mol/L mannitol+0.1% MES and CPW solution.The enzyme mixture was for 5 h at(25±2)℃.High yield and viability protoplasts were obtained when purified by centrifugation at 600 r/min for 5 min and the callus for 12 days.
Keywords:Allium cepa  protoplast  isolation  purification  
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