| 流行性乙型脑炎prM蛋白剪切位点突变的prM-E蛋白表达细胞系的建立 |
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| 引用本文： | 李业南,陈振师,步志高,华荣虹.流行性乙型脑炎prM蛋白剪切位点突变的prM-E蛋白表达细胞系的建立[J].中国预防兽医学报,2013,35(3). |
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| 作者姓名： | 李业南 陈振师 步志高 华荣虹 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨,150001 |
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| 基金项目： | 国家公益性行业(农业)科研专项，中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 |
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| 摘 要： | 为建立稳定共表达乙型脑炎病-毒(JEV)完整M前体蛋白(prM)和E蛋白的BHK-21细胞系,本研究在prM蛋白furin蛋白酶剪切位点编码基因中引入突变,将突变后的prM基因克隆于质粒中构建重组表达质粒pCAG-JEV-prM(R89A)E.将重组质粒转染BHK-21细胞,转染48 h后细胞用含G418的选择性培养基选择培养,进一步经细胞克隆纯化制备表达剪切位点突变的JEV prM-E蛋白的稳定细胞系.经IFA和western blot鉴定表明,该细胞系能表达JEV prM与E蛋白,所表达的prM蛋白未发生剪切；细胞经多次传代后仍能够稳定地共表达prM与E蛋白.该细胞系的建立为研究prM蛋白剪切对JEV粒子形成的影响以及亚单位疫苗的制备奠定了基础.
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| 关 键 词： | 流行性乙型脑炎病毒 prM蛋白 蛋白剪切 细胞系 |
Establishment of cell lines stably co-expressing Japanese encephalitis virus prM and E protein with a mutant in prM furin cleavage site |
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| LI Ye-nan
,
CHEN Zhen-shi
,
BU Zhi-gao
,
HUA Rong-hong.Establishment of cell lines stably co-expressing Japanese encephalitis virus prM and E protein with a mutant in prM furin cleavage site[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2013,35(3). |
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| Authors: | LI Ye-nan CHEN Zhen-shi BU Zhi-gao HUA Rong-hong |
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