毛皮中6种致病菌基因芯片检测方法的建立和应用 |
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引用本文: | 冯松凯,李苗云,徐超,张勤,苗丽,李珂,杨娜,刘胜男,吕晓飞.毛皮中6种致病菌基因芯片检测方法的建立和应用[J].中国预防兽医学报,2013,35(5). |
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作者姓名: | 冯松凯 李苗云 徐超 张勤 苗丽 李珂 杨娜 刘胜男 吕晓飞 |
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作者单位: | 1. 河南农业大学食品科学技术学院,河南郑州,450002 2. 河南出入境检验检疫局,河南郑州,450003 3. 三门峡出入境检验检疫局,河南三门峡,472000 |
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基金项目: | 中国检科院基本科研业务费专项 |
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摘 要: | 为建立同时检测皮毛中携带的布鲁氏菌、大肠杆菌O157、金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、丹毒杆菌、铜绿假单胞杆菌6种致病菌的基因芯片检测方法,本研究根据NCBI中细菌的16S rDNA和gyrB基因序列,分别设计通用引物和特异性寡核苷酸探针.点样制备检测基因芯片,核酸杂交后,优化并建立同时检测6种致病菌的基因芯片方法.结果表明:使用47%甲酰胺杂交液,42℃摇转杂交4h为最佳杂交条件.建立的基因芯片方法在多种致病菌之间无交叉反应,检测敏感性可达10拷贝.制备的基因芯片稳定,有效保存期为6个月.该基因芯片对临床样品的检测结果与PCR平行检测结果的符合率为100%.本研究建立的基因芯片检测皮毛中6种致病菌的方法具有高通量、灵敏和特异的特点,为临床皮毛中致病菌的检测和监控提供了新的检测方法.
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关 键 词: | 皮毛 6种致病菌 基因芯片 检测 |
Development of an oligonucleotide based microarray for detecting six kinds of bacteria in animal fur |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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