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化脓隐秘杆菌溶血素蛋白的原核表达及其溶血活性鉴定
引用本文:孟祥莉,母晓宇,刘晓丹,徐凝,王璞,高明春,张文龙,王君伟.化脓隐秘杆菌溶血素蛋白的原核表达及其溶血活性鉴定[J].中国预防兽医学报,2013,35(6).
作者姓名:孟祥莉  母晓宇  刘晓丹  徐凝  王璞  高明春  张文龙  王君伟
作者单位:东北农业大学动物医学院,黑龙江哈尔滨,150030
基金项目:现代农业产业技术体系建设专项资金,黑龙江省教育厅科学技术研究项目
摘    要:为研究化脓隐秘杆菌致病机制及其病原学诊断方法,本研究克隆了编码化脓隐秘杆菌溶血素蛋白的plo基因,并构建重组表达质粒pET-plo,转化大肠杆菌Rosetta (DE3)感受态细胞中诱导表达.SDS-PAGE检测结果显示,表达的重组蛋白约为62 ku,western blot分析表明表达的重组蛋白可以与鼠抗化脓隐秘杆菌血清发生反应.采用重组蛋白免疫新西兰白兔制备的多克隆抗体效价达到1∶128 000,western blot和琼脂双扩散试验表明制备的多克隆抗体能够与天然PLO蛋白发生反应.溶血试验表明重组蛋白能够溶解红细胞,制备的多克隆抗体能有效中和重组蛋白的溶血活性.

关 键 词:溶血素  原核表达  鉴定  多克隆抗体

Expression of Arcanobacterium pyogenes pyolysin in Escherichia coil and the hemolytic activity identification
Abstract:
Keywords:Pyolysin (PLO)  expression  identification  polyclonal-antibody
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