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| 表达西尼罗病毒E蛋白重组腺病毒的构建及鉴定 | |
| 引用本文： | 张翠云,赵晶,陈韬,孙恩成,刘霓红,杨涛,徐青元,王文世,魏鹏.表达西尼罗病毒E蛋白重组腺病毒的构建及鉴定[J].中国预防兽医学报,2013,35(4). |
| 作者姓名： | 张翠云 赵晶 陈韬 孙恩成 刘霓红 杨涛 徐青元 王文世 魏鹏 |
| 作者单位： | 1. 湖南农业大学动物医学学院,湖南长沙410128;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室,黑龙江哈尔滨150001 2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室,黑龙江哈尔滨,150001 3. 湖南农业大学动物医学学院,湖南长沙,410128 |
| 基金项目： | 国家863项目，黑龙江省自然科学基金，兽医生物技术国家重点实验室基金 |
| 摘 要： | 为构建表达西尼罗病毒(WNV)E蛋白的重组腺病毒,本实验将WNV的E基因克隆至腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV中,经Pme Ⅰ酶切线性化后电转化于含有人5型缺陷腺病毒的骨架的BJ5183感受态大肠杆菌中进行同源重组,构建重组质粒pAd-WNV-E;将其经Pac Ⅰ酶切线性化后通过脂质体介导转染于人胚肾细胞Ad-293细胞,制备重组腺病毒rAd-WNV-E;经western blot以及间接免疫荧光鉴定表明WNVE蛋白在Ad-293细胞中获得有效表达.病毒滴度测定试验结果显示,该重组腺病毒与野毒型腺病毒复制能力相近.该重组腺病毒的构建为进一步研制表达WNVE蛋白的重组腺病毒的疫苗奠定了基础. |
| 关 键 词： | 西尼罗病毒 E蛋白 重组腺病毒 |
Construction of the recombinant adenovirus expressing E protein of West Nile virus |
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| Keywords: | |
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