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大豆查尔酮还原酶基因GmCHR的克隆与植物表达载体构建
引用本文:刘江,陈沛,邢光南,赵团结,李艳,盖钧镒.大豆查尔酮还原酶基因GmCHR的克隆与植物表达载体构建[J].大豆科学,2013,32(2).
作者姓名:刘江  陈沛  邢光南  赵团结  李艳  盖钧镒
作者单位:南京农业大学大豆研究所/国家大豆改良中心/农业部大豆生物学与遗传育种重点实验室/作物遗传与种质创新国家重点实验室,江苏南京,210095
基金项目:国家重点基础研究发展计划"973计划",国家自然科学基金,江苏省优势学科建设工程专项和国家重点实验室自主课题,国家现代农业产业技术体系建设专项资金,农业部大豆生物学与遗传育种创新团队
摘    要:黄酮类化合物在植物中参与过滤紫外线、固氮和花色形成等过程,异黄酮对人体有抗氧化、预防乳腺癌等保健作用。查尔酮还原酶(chalcone reductase,CHR)是植物中参与黄酮类化合物代谢的重要酶。克隆大豆查尔酮还原酶基因并构建植物表达载体,有助于进一步研究其功能和异黄酮的代谢过程。采用RT-PCR方法,从栽培大豆(Gly-cine max)南农1138-2中,克隆得到了第14号染色体上的一个编码大豆查尔酮还原酶(chalcone reductase,CHR)的基因,命名为GmCHR。该基因含有948 bp长的编码区序列(Coding DNA Sequence,CDS),编码315个氨基酸。预测其蛋白质分子量为35.5 kDa,等电点为6.32。与其他豆科植物中的查尔酮还原酶相比,GmCHR蛋白序列与葛藤(Puerari-ae montana)CHR的相似性最高,达94%。组织表达分析表明,在自然生长条件下GmCHR在叶中的表达量最大;其次是种子;在花和茎中相同;在根中的表达量最小。利用Gateway方法获得植物过表达载体pMDC83-GmCHR,经检测表明过表达载体已成功转化农杆菌EHA105,为今后进一步了解GmCHR在大豆异黄酮代谢过程中的功能提供材料基础。

关 键 词:大豆  异黄酮  查尔酮还原酶  基因表达

Cloning of the Soybean Chalcone Reductase Gene GmCHR and Construction of Its Plant Expression Vector
LIU Jiang , CHEN Pei , XING Guang-nan , ZHAO Tuan-jie , LI Yan , GAI Jun-yi.Cloning of the Soybean Chalcone Reductase Gene GmCHR and Construction of Its Plant Expression Vector[J].Soybean Science,2013,32(2).
Authors:LIU Jiang  CHEN Pei  XING Guang-nan  ZHAO Tuan-jie  LI Yan  GAI Jun-yi
Abstract:
Keywords:
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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