| 人工合成的脑心肌炎病毒VP1表位基因在大肠杆菌中的表达与抗原性测定 |
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| 引用本文： | 韩研妍,姜平,顾小雪,李玉峰.人工合成的脑心肌炎病毒VP1表位基因在大肠杆菌中的表达与抗原性测定[J].农村．农业．农民,2005(4):100-103. |
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| 作者姓名： | 韩研妍 姜平 顾小雪 李玉峰 |
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| 作者单位： | 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏,南京,210095 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏,南京,210095 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏,南京,210095 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏,南京,210095 |
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| 摘 要： | 在分析脑心肌炎病毒VP1蛋白抗原表位基础上人工合成一段含VP1抗原表位双链DNA序列(150 bp),克隆于原核表达载体pGEX-6p-1,经酶切鉴定后转化大肠杆菌(E coli)BL21感受态细胞,以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白.经过GSTrap FF亲和层析柱获得纯化蛋白,经SDS-PAGE电泳显示相对分子质量为30800.以该纯化蛋白免疫家兔,获得效价分别为1:25 600和1:1600的抗血清.Westem-blot结果显示该融合蛋白与经过空载体pGEX-6p-1表达的GST蛋白孵育的抗血清反应后有明显的特异性条带.结果表明:脑心肌炎病毒VP1蛋白抗原表位区150 bp编码基因在E.coli中获得正确表达,纯化后的蛋白具有抗原性.
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| 关 键 词： | 脑心肌炎病毒 VP1蛋白抗原表位 原核表达 抗原性 |
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