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| 柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)杂交株F2 SO7基因ORF的克隆与表达 | |
| 引用本文： | 杨桂连,张西臣,赵权,李建华,尹继刚.柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)杂交株F2 SO7基因ORF的克隆与表达[J].中国预防兽医学报,2007,29(4):285-289. |
| 作者姓名： | 杨桂连 张西臣 赵权 李建华 尹继刚 |
| 作者单位： | 1. 吉林大学,畜牧兽医学院,吉林,长春,130062;吉林农业大学,动物科学技术学院,吉林,长春,130118 2. 吉林大学,畜牧兽医学院,吉林,长春,130062 3. 吉林农业大学,动物科学技术学院,吉林,长春,130118 |
| 摘 要： | 用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)杂交株F2F1(JL×HB)×SD]的总RNA中扩增了651 bp的SO7基因ORF。通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至pMD18-T中,转化至受体菌DH5α中,经PCR及酶切鉴定确定阳性克隆pMD18-T-SO7,然后进行序列测定及分析确定成功克隆SO7基因ORF。经DNAStar软件分析核苷酸和氨基酸序列,结果显示扩增出了完整的SO7开放阅读框架,含651个核苷酸,富含AGC重复序列,编码216个氨基酸。与国外株SO7比较,核苷酸序列的同源性为97.7%,有15个核苷酸发生突变,其中9个为有义突变,氨基酸序列的同源性为94.9%。将获得的重组阳性克隆质粒pMD18-T-SO7与融合型表达载体pGEX-6p-1均以BamH I和EcoR I双酶切后。进行连接转化与克隆鉴定。将阳性克隆pGEX-6p-SO7转化至感受态E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,可见约43.8 Ku融合蛋白带。Western blot分析发现,该蛋白具有E-tenella抗原性,从而为进一步研制E.tenella杂交株F2基因工程疫苗奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 杂交株F2 克隆 表达 |
| 文章编号： | 1008-0589（2007）04-0285-05 |
| 收稿时间： | 2006-02-14 |
| 修稿时间： | 2006年2月14日 |
Cloning and expression of SO7 gene ORF of Eimeria tenella F2 hybrid strain |
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| YANG Gui-lian,ZHANG Xi-chen,ZHAO Quan,LI Jian-hua,YIN Ji-gang.Cloning and expression of SO7 gene ORF of Eimeria tenella F2 hybrid strain[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2007,29(4):285-289. | |
| Authors: | YANG Gui-lian ZHANG Xi-chen ZHAO Quan LI Jian-hua YIN Ji-gang |
| Abstract: | |
| Keywords: | E tenella SO7 |
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