| 牛MYOZ1基因启动子活性分析 |
| |
| 引用本文： | 王明明,李安宁,赵志东,等.牛MYOZ1基因启动子活性分析[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2016,44(9):1-9. |
| |
| 作者姓名： | 王明明 李安宁 赵志东 等 |
| |
| 作者单位： | 西北农林科技大学 动物科技学院,西北农林科技大学 动物科技学院,西北农林科技大学 动物科技学院 |
| |
| 基金项目： | “十二五”国家“863”计划项目（2013AA102505，2011AA100307-02）；国家现代农业产业技术体系建设专项（CARS-38）；“十二五”国家科技支撑计划项目（2011BAD28B04-03） |
| |
| 摘 要： | 【目的】鉴定牛MYOZ1基因转录起始位点,确定牛MYOZ1基因核心启动子区域,为进一步研究牛MYOZ1基因的转录调控机制奠定基础。【方法】以秦川牛肌肉5′RACE准备cDNA为模板,设计5′RACE扩增试验,确定牛MYOZ1基因转录起始位点。以秦川牛外周血基因组DNA为模板,通过PCR克隆获得牛MYOZ1基因转录调控区-1 628/+61目的片段。通过生物信息学分析软件预测可能包含的转录因子结合位点,设计逐段缺失引物,获得7个亚克隆,将其分别与pGL3-Basic载体连接,得到牛MYOZ1基因启动子双荧光素酶报告基因重组质粒,通过脂质体法转染C2C12细胞系,检测7个重组质粒的荧光素酶活性,分析启动子活性。【结果】确定了牛MYOZ1基因的转录起始位点,成功克隆获得7个系列缺失的牛MYOZ1基因启动子双荧光素酶报告基因重组质粒:pMYOZ1-1 628/+61、pMYOZ1-1 430/+61、pMYOZ1-1 179/+61、pMYOZ1-932/+61、pMYOZ1-676/+61、pMYOZ1-437/+61和pMYOZ1-116/+61,其中重组质粒pMYOZ1-116/+61启动子活性极显著高于pGL3-Basic,推测牛MYOZ1基因-116/+61区域可能包含核心启动子;重组质粒pMYOZ1-1 628/+61启动子活性极显著高于pMYOZ1-1 430/+61片段活性(P0.01),表明牛MYOZ1基因启动子区域-1 628/-1 430片段可能包含启动子活性增强元件。生物信息学分析发现,牛MYOZ1基因启动子-116/+61片段可能包含SP1、GC Box、CAAT等多个重要转录因子结合位点;-1 628/-1 430片段可能包含SP1、MyoD等多个重要转录因子结合位点。【结论】成功构建了7个系列缺失的牛MYOZ1基因启动子双荧光素酶报告基因重组质粒,且初步确定了牛MYOZ1基因的核心启动子区域位于-116/+61。
|
| 关 键 词： | 牛 MYOZ1 5′ RACE 启动子 双荧光素酶报告载体 |
| 收稿时间： | 2015/2/11 0:00:00 |
Activity of bovine MYOZ1 gene promoter |
| |
| WANG Mingming,LI Anning and ZHAO Zhidong,et al.Activity of bovine MYOZ1 gene promoter[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2016,44(9):1-9. |
| |
| Authors: | WANG Mingming LI Anning and ZHAO Zhidong |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《西北农林科技大学学报(社会科学版)》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《西北农林科技大学学报(社会科学版)》下载免费的PDF全文 |
|
