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棉铃虫BR-C Z4基因的克隆及表达分析
引用本文:刘静,张连军,胡得琴,张亚林,刘小宁.棉铃虫BR-C Z4基因的克隆及表达分析[J].植物保护学报,2023,50(4):962-971.
作者姓名:刘静  张连军  胡得琴  张亚林  刘小宁
作者单位:新疆大学生命科学与技术学院, 新疆生物资源基因工程重点实验室, 乌鲁木齐 830017
基金项目:国家自然科学基金(31972279),新疆维吾尔自治区天山雪松计划(2017xs02)
摘    要:为明确转录因子广泛锌指复合物(broad-complex,BR-C)Z4亚型在棉铃虫Helicoverpa armigera生长发育过程中的作用,基于2-十三烷酮(2-tridecanone,2-TD)处理的棉铃虫幼虫中肠转录组数据克隆获得BR-C Z4的开放阅读框(open reading frame,ORF)序列,对其氨基酸序列和编码蛋白质进行生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qPCR)技术分析BR-C Z4基因在棉铃虫不同龄期、不同组织和2-TD处理6龄幼虫中的表达规律以及其和Ⅳ型几丁质酶(chitinase IV,CHT4)编码基因在4~6龄初、末期幼虫中的表达规律。结果表明,克隆获得的棉铃虫BR-C Z4基因的ORF为1 347 bp,编码448个氨基酸,预测编码蛋白质的分子量和理论等电点分别为49.8 kD和7.75,且主要定位于细胞核中。系统进化分析结果显示,棉铃虫BR-C Z4与家蚕Bombyx mori和烟草天蛾Manduca sextaBR-C Z4亲缘关系最近。BR-C Z4基因在棉铃虫整个生长期均有表达,在3龄期的相对表达量最低而在预蛹期的相对表达量最高;该基因在棉铃虫6龄幼虫的脂肪体、中肠、体壁和头部均有表达,在头部的相对表达量最低,在中肠中的相对表达量最高; BR-C Z4CHT4基因在棉铃虫4~6龄末期幼虫中的相对表达量均显著高于4~6龄初期幼虫;相关性分析结果显示BR-C Z4CHT4的相对表达量呈极显著正相关;随着2-TD处理浓度的增加,棉铃虫BR-C Z4基因的相对表达量总体呈现先上升后下降的趋势,其中15 mg/g浓度处理20 h时BR-C Z4基因相对表达量达到峰值,而20 mg/g浓度处理6 h时BR-C Z4基因相对表达量降到最低,为对照的22.73%。推测BR-C Z4基因在棉铃虫变态发育和应对2-TD胁迫过程中发挥着重要作用。

关 键 词:棉铃虫  广泛锌指复合物  克隆  时空表达  2-十三烷酮
收稿时间:2022/3/25 0:00:00

Cloning and expression analysis of BR-C Z4 gene in cotton bollworm Helicoverpa armigera
Liu Jing,Zhang Lianjun,Hu Deqin,Zhang Yalin,Liu Xiaoning.Cloning and expression analysis of BR-C Z4 gene in cotton bollworm Helicoverpa armigera[J].Acta Phytophylacica Sinica,2023,50(4):962-971.
Authors:Liu Jing  Zhang Lianjun  Hu Deqin  Zhang Yalin  Liu Xiaoning
Institution:Xinjiang Key Laboratory of Biological Resources and Genetic Engineering, College of Life Science and Technology, Xinjiang University, Urumqi 830017, Xinjiang UygurAutonomous Region, China
Abstract:
Keywords:Helicoverpa armigera  broad-complex (BR-C)  cloning  temporal and spatial expression  2-tridecanone (2-TD)
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