| 用黄曲霉毒素B1单抗介导免疫组化法检测雏鸭感染黄曲霉毒素的分布规律研究 |
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| 引用本文： | 程安春,刘艳丽,朱德康,汪铭书,胡骑,陈孝跃.用黄曲霉毒素B1单抗介导免疫组化法检测雏鸭感染黄曲霉毒素的分布规律研究[J].中国农业科学,2008,41(8):2460-2466. |
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| 作者姓名： | 程安春 刘艳丽 朱德康 汪铭书 胡骑 陈孝跃 |
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| 作者单位： | 四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心 |
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| 基金项目： | 国家农业科技成果转化资金项目
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国家"十一五"科技支撑计划
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教育部"新世纪优秀人才支持计划"项目
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四川省重点建设学科项目 |
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| 摘 要： | 【目的】（1）建立单抗介导的、能够对黄曲霉毒素AFB1进行亚细胞定位的免疫组化方法；（2）探明AFB1侵染和分布于雏鸭靶器官（细胞）规律，为阐明AFB1对雏鸭的致病机理提供基础实验数据，为AFB1感染人类提供研究模型。【方法】（1）利用AFB1单抗、免疫组化理论和方法，结合石蜡切片技术，建立检测感染雏鸭组织器官和细胞中AFB1方法；（2）7日龄樱桃谷鸭饲喂黄曲霉毒素（AFB1）含量为150 µg•kg-1的全价饲料，分别于6、12、24、48、72、96、120、144、168和192 h各剖杀2只，取心、肝、脾、肺、肾、脑、十二指肠、法氏囊、胸腺和胰腺等组织器官多聚甲醛固定、石蜡包埋，应用建立的单抗介导免疫组化对AFB1在感染雏鸭体内侵染的组织器官和细胞进行定位检测。【结果】（1）建立的单抗介导的免疫组化能够特异性检测到感染雏鸭组织中的AFB1，而对鸭病毒性肝炎病毒、鸭疫里默氏杆菌、鸭多杀性巴氏杆菌、鸭沙门氏菌和鸭大肠杆菌感染鸭组织呈现阴性反应；（2）雏鸭采食含AFB1饲料后，24 h可在肝脏和肾脏中检测到AFB1，随后在脾脏（48 h）、胰腺（96 h）、十二指肠（120 h）、心肌（144 h）及法氏囊（168 h）检测到AFB1，其中肝脏和肾脏的阳性结果最强；AFB1分布于肝脏肝窦及汇管区周围炎性反应带的肝细胞，肾脏肾小管、集合管上皮细胞以及肾小球毛细血管，脾脏白髓及炎性细胞，胰腺腺上皮细胞，十二指肠脱落的黏膜上皮细胞，心脏血管周围和心脏发生空泡变性的心肌纤维中；AFB1主要集中分布于细胞核内，而细胞膜和细胞浆内也有少量的分布。【结论】（1）单抗介导免疫组化能够特异检测AFB1感染雏鸭组织石蜡切片中的AFB1和亚细胞定位, 还可用于AFB1感染雏鸭的实验室诊断和甲醛固定组织的回顾性诊断；（2）AFB1可广泛侵害感染雏鸭各个组织器官,以肝脏和肾脏最为严重。AFB1主要蓄积于被感染的细胞核。
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| 关 键 词： | 免疫组化 黄曲霉毒素 雏鸭 侵染 |
| 收稿时间： | 2007-6-12 |
Research on the Invading Process and Distribution of Aflatoxin B1 in Artificially Infected Ducklings by Development and Application of MonoclonaI-Antibody Mediated Immunohistochemistry |
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