| 滑液囊支原体贵州株膜蛋白EF-Tu、pdhβ免疫原性分析 |
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| 引用本文： | 宋春,王柏林,李梅,文明,王开功,陈常秀,程振涛.滑液囊支原体贵州株膜蛋白EF-Tu、pdhβ免疫原性分析[J].黑龙江畜牧兽医,2022(7):7-12. |
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| 作者姓名： | 宋春 王柏林 李梅 文明 王开功 陈常秀 程振涛 |
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| 作者单位： | 1. 贵州大学动物科学学院;2. 贵州省动物疫病与兽医公共卫生重点实验室;3. 临沂大学农林科学学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(32060786)；;贵州省科技计划项目(黔科合支撑[2021]一般161号；黔科合基础[2020]1Y409)； |
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| 摘 要： | 为了研究鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)膜蛋白EF-Tu和pdhβ的免疫应答效果，试验针对目的基因设计特异性引物，经PCR扩增并构建原核表达载体，应用相关软件对其核苷酸和氨基酸序列进行生物信息学分析，对目的蛋白进行诱导表达并进行动物免疫试验。结果表明：PCR扩增EF-Tu和pdhβ基因得到特异性条带，大小为1 185 bp和993 bp;成功构建了重组质粒pET32a-EF-Tu和pET32a-pdhβ;滑液囊支原体贵州分离株(MS-GZ-ZJ株)同其他流行株的EF-Tu基因同源性在99.7%～100%之间，pdhβ基因同源性在99.6%～100%之间，说明MS-GZ-ZJ株EF-Tu、pdhβ基因高度保守；EF-Tu、pdhβ蛋白的分子质量分别为43 ku和35 ku,是稳定的亲水蛋白；EF-Tu蛋白二级结构以α-螺旋、无规则卷曲和延伸链为主，pdhβ蛋白以α-螺旋和无规则卷曲为主。表达的蛋白大小与预期相符，EF-Tu蛋白主要为可溶性表达，pdhβ蛋白主要为包涵体表达；EF-Tu、pdhβ重组蛋白均能与MS阳性血清特异性结合。EF-Tu重组蛋白不能单独诱...
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| 关 键 词： | 滑液囊支原体 EF-Tu基因 pdhβ基因 生物信息学 原核表达 免疫原性 |
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