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干扰UBE2N对牛骨骼肌卫星细胞增殖与成肌分化的影响
引用本文:于州,胡迪,朱菲菲,郭益文,张林林,李新,郭宏,丁向彬.干扰UBE2N对牛骨骼肌卫星细胞增殖与成肌分化的影响[J].黑龙江畜牧兽医,2022(7):60-64+70+129.
作者姓名:于州  胡迪  朱菲菲  郭益文  张林林  李新  郭宏  丁向彬
作者单位:天津农学院动物科学与动物医学学院/天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室
基金项目:天津市自然科学基金项目(18JCYBJC29700);;天津市“131”创新型人才培养工程第一层次人选计划项目(J010070806);
摘    要:为了探究泛素结合酶2N(ubiquitin-conjugating enzyme 2N, UBE2N)对牛骨骼肌卫星细胞(skeletal muscle satellite cells, MSCs)增殖和分化的影响,试验采用天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室冻存的牛MSCs建立成肌分化模型,设计UBE2N的siRNA(si-UBE2N)构建UBE2N的干扰模型,转染牛MSCs,并以转染si-NC作为对照;采用qRT-PCR和Western-blot方法分别检测转染后对UBE2N基因和蛋白表达的干扰效果;采用5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色法检测si-UBE2N对牛MSCs增殖的影响;在荧光倒置显微镜下观察分化期(DM期)牛MSCs的肌管形成状态,通过qRT-PCR和Western-blot方法分别检测MSCs中肌细胞生成素(MyoG)和肌球重链蛋白(MyHC)基因和蛋白表达水平,分析转染si-UBE2N对牛MSCs分化的影响。结果表明:与对照组相比,转染si-UBE2N后UBE2N基因和蛋白相对表达量极显著降低(P<0.01)。干扰UBE2N后经EdU染色发现,牛...

关 键 词:  UBE2N  骨骼肌卫星细胞(MSCs)  增殖  细胞分化
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