| 牛支原体间接ELISA检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 金云云,剡根强,王静梅,王超丽,马玉英.牛支原体间接ELISA检测方法的建立[J].畜牧与兽医,2014(2):10-13. |
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| 作者姓名： | 金云云 剡根强 王静梅 王超丽 马玉英 |
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| 作者单位： | ;1.石河子大学动物科技学院;2.新疆石河子工程技术学校 |
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| 摘 要： | 以牛支原体(Mycoplasma bovis)全菌蛋白经超声波裂解后的裂解物作为包被用抗原,建立检测牛支原体血清抗体的间接ELISA方法。通过棋盘滴定法确定抗原最适包被浓度、待检血清最佳稀释度,同时对抗原的包被方式、封闭剂和封闭时间、酶标二抗最佳工作浓度、一抗和二抗最佳作用时间、血清稀释液、底物显色时间进行优化。用该方法测定10份阴性血清的OD450值计算出阴性临界值,并对牛布氏杆菌病、牛病毒性腹泻黏膜病抗血清进行检测。结果:抗原最适包被浓度为200μg/mL,待检血清最佳稀释度为1∶100,阴性临界值为0.327。用该方法检测牛布氏杆菌病、牛病毒性腹泻黏膜病抗血清均无交叉反应,表明该间接ELISA具有很好的特异性。
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| 关 键 词： | 间接ELISA 牛支原体 抗体 |
Development of indirect ELISA method for detection of Mycoplasma bovine |
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