禽腺病毒4型湖北株的分离鉴定及其Fiber2蛋白在乳酸菌中的表达 |
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引用本文: | 李剑,徐鹏飞,叶十一,陈红心,周启立,翁长江,熊涛.禽腺病毒4型湖北株的分离鉴定及其Fiber2蛋白在乳酸菌中的表达[J].江苏农业科学,2022(23):153-158. |
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作者姓名: | 李剑 徐鹏飞 叶十一 陈红心 周启立 翁长江 熊涛 |
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作者单位: | 1. 长江大学生命科学学院;2. 大北农集团湖北分公司;3. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 |
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基金项目: | 兽医生物技术国家重点实验室开放课题(编号:SKLVBF202109); |
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摘 要: | 为研究湖北地区禽腺病毒4型遗传进化情况及其Fiber2蛋白在乳酸菌中的表达情况,将采集于湖北省某养鸡场的病变组织样处理后接种至LMH细胞,分离出2株禽腺病毒,通过PCR鉴定和Hexon基因测序分析表明为禽腺病毒4型,并命名为HBJZ2021A和HBJZ2021B,遗传进化树分析结果表明,其与国内山东、浙江和北京等地区的毒株亲缘关系较近,处于同一进化分支。以其基因组DNA为模板扩增Fiber2基因并克隆至乳酸菌表达载体pNZ8148,通过酶切和测序表明成功构建了重组表达载体pNZ8148-Fiber2,并通过电转转化至NZ 9000乳酸菌,采用不同浓度梯度的Nisin进行诱导表达,SDS-PAGE及Western-Blot分析结果显示,成功在上清中表达了Fiber2蛋白。该研究结果为湖北地区禽腺病毒4型的流行情况及其口服疫苗的开发提供了参考依据。
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关 键 词: | 禽腺病毒4型 分离鉴定 遗传进化 Fiber2蛋白表达 基因测序 |
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