| 甘蓝型油菜R2/R3型MYB转录因子BnPAP2a介导花青素累积研究 |
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| 引用本文： | 李 芳,唐秀华,张彦锋,等.甘蓝型油菜R2/R3型MYB转录因子BnPAP2a介导花青素累积研究[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2023,51(7):35-44. |
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| 作者姓名： | 李 芳 唐秀华 张彦锋 等 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学 生命科学学院;陕西省杂交油菜研究中心 |
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| 基金项目： | 陕西省重点研发计划一般项目-农业领域（2018NY-097）；陕西省创新能力支撑计划项目（2020TD-051）；陕西省油菜分子设计育种科技资源共享平台项目（2021PT-036） |
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| 摘 要： | 【目的】探讨甘蓝型油菜R2/R3型MYB转录因子BnPAP2a对花青素累积的作用，为富含花青素油菜的培育提供理论指导。【方法】在全基因组水平系统鉴定甘蓝型油菜PAP1、PAP2亚家族R2/R3型MYB转录因子同源基因。利用BnTIR网站、BRAD网站和GSDS等软件对鉴定所得基因的结构、蛋白序列和组织表达谱进行分析。采用RT-PCR方法从“中双11”cDNA中扩增BnPAP2a基因，并构建35S启动子驱动的植物表达载体35S-pHZM27-BnPAP2a-mGFP，将其转染拟南芥，用显微成像法进行转基因株系种子与幼苗花青素累积表型分析；采用分光光度法测算转基因株系幼苗花青素水平；采用荧光成像技术考察转基因株系中BnPAP2a的亚细胞定位。【结果】成功地在甘蓝型油菜中鉴定到9个PAP1、PAP2亚家族R2/R3型MYB转录因子同源基因，分别为BnPAP1a，BnPAP1b，BnPAP1c，BnPAP1d，BnPAP1e，BnPAP1f，BnPAP1g，BnPAP2a，BnPAP2b。基因结构分析结果显示，拟南芥、白菜、甘蓝和甘蓝型油菜的MYB转录因子同源基因大都含有3个外显子和2个内含子。基因组织表达谱分析表明，BnPAP2a在叶片、花、花蕾、果荚中均有表达但其表达水平不高。成功构建了35S-pHZM27-BnPAP2a-mGFP载体，转染后获得了转基因拟南芥植株。过量表达BnPAP2a基因可使拟南芥种皮由黄褐色转变成紫黑色，幼苗叶片由绿色变为紫色，花青素含量极显著增加。激光共聚焦显微镜下观察发现，过表达BnPAP2a植株GFP荧光信号主要集中在细胞核中。【结论】BnPAP2a为功能性的细胞核定位R2/R3型MYB转录因子，具有促进花青素形成的作用，可利用其培育富含花青素的油菜新材料。
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| 关 键 词： | 甘蓝型油菜 花青素 BnPAP2a MYB转录因子 油菜育种 |
| 收稿时间： | 2022/4/26 0:00:00 |
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