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H5N1型禽流感病毒HA基因克隆及序列分析
引用本文:申 燕,高冬妮,安 琦,刘 颖,葛菁萍,平文祥.H5N1型禽流感病毒HA基因克隆及序列分析[J].中国农学通报,2015,31(14):32-38.
作者姓名:申 燕  高冬妮  安 琦  刘 颖  葛菁萍  平文祥
作者单位:黑龙江大学生命科学学院/微生物省高校重点实验室,黑龙江大学生命科学学院/微生物省高校重点实验室,黑龙江大学生命科学学院/微生物省高校重点实验室,黑龙江大学生命科学学院/微生物省高校重点实验室,黑龙江大学生命科学学院/微生物省高校重点实验室,黑龙江大学生命科学学院/微生物省高校重点实验室
基金项目:基金项目:国家自然科学基金“表达IBDV主要保护性抗原的重组杆状病毒构建及其作为疫苗的免疫效果研究”(31270143);国家自然科学基金“菌群演替与温水沤麻系统关键酶产生菌代谢组学特征的耦合机制”(31270534);黑龙江省高等学校科技创新团队“农业微生物发酵技术”(2012td009);黑龙江大学高层次人才(创新团队)支持计划“功能微生物选育及其产物应用”(Hdtd2010-17)。
摘    要:为从分子生物学角度进一步研究H5N1型禽流感主要抗原HA基因,探究H5N1HA基因的遗传变异情况及其蛋白结构,根据GenBank中登录的H5N1型禽流感HA基因的序列利用Primer5.0设计引物扩增HA基因,将其克隆到pMD18-T载体后进行鉴定,对鉴定正确的重组质粒pMD-H5N1-HA进行测序分析。应用生物信息学软件对禽流感病毒HA基因进行系统进化树分析、氨基酸序列同源性分析、保守区分析,磷酸化位点和序列重复区分析及HA蛋白二级、三级结构的预测。核苷酸序列测定结果表明:HA基因长1661bp,共编码326个氨基酸;生物信息学分析结果表明:HA基因在种间具有较高保守性,HA基因的氨基酸序列与其他地方性禽流感H5N1病毒株HA基因的序列同源性最高可达99.7%,且为高致病性毒株;HA蛋白的二级、三级结构预测结果显示:HA蛋白多为α螺旋和β转角结构,无规则卷曲,是亲水性蛋白。该结果为禽流感病毒的分子病毒学研究奠定了基础。

关 键 词:禽流感病毒  HA基因  序列分析  蛋白结构预测
收稿时间:2014/12/18 0:00:00
修稿时间:2015/2/14 0:00:00

Cloning and Sequence Analysis of HA Gene of H5N1 Avian Influenza Virus
Shen Yan,Gao Dongni,An Qi,Liu Ying,Ge Jingping and Ping Wenxiang.Cloning and Sequence Analysis of HA Gene of H5N1 Avian Influenza Virus[J].Chinese Agricultural Science Bulletin,2015,31(14):32-38.
Authors:Shen Yan  Gao Dongni  An Qi  Liu Ying  Ge Jingping and Ping Wenxiang
Institution:College of Life Science, Heilongjiang University/Key Laboratory of Microbiology,College of Life Science, Heilongjiang University/Key Laboratory of Microbiology,College of Life Science, Heilongjiang University/Key Laboratory of Microbiology,College of Life Science, Heilongjiang University/Key Laboratory of Microbiology,College of Life Science, Heilongjiang University/Key Laboratory of Microbiology,College of Life Science, Heilongjiang University/Key Laboratory of Microbiology
Abstract:
Keywords:avian influenza virus  HA gene  sequence analysis  protein structure prediction
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