猪β-防御素-2基因在大肠杆菌中的融合表达及抑菌活性检测 |
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引用本文: | 谢飞,吴雅琨,冯秋月,陈慧鑫,王安如,彭子欣.猪β-防御素-2基因在大肠杆菌中的融合表达及抑菌活性检测[J].中国畜牧兽医,2013,40(2):6-9. |
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作者姓名: | 谢飞 吴雅琨 冯秋月 陈慧鑫 王安如 彭子欣 |
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作者单位: | 北京大北农科技集团股份有限公司,饲用微生物工程国家重点实验室,北京 100193 |
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基金项目: | 国家973计划项目“安全饲料添加剂乳杆菌作用的分子机理研究”(2012CB723702) |
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摘 要: | 将猪β-防御素-2基因(pBD-2)片段正确连接到pET32a载体上,从而得到稳定表达pBD-2的大肠杆菌表达株。根据已报道的pBD-2基因序列,按大肠杆菌密码子优化原则合成了5条pBD-2基因片段,通过重叠延伸PCR(SOE PCR)方法将这5段延伸成完整的pBD-2基因序列,将该基因定向插入原核表达质粒pET32a的多克隆位点上,成功地在大肠杆菌BL21(DE3)中表达出TrxA-pBD2融合蛋白。结果显示,表达的融合蛋白用肠激酶切掉TrxA后做琼脂孔穴扩散法检测,pBD-2对金黄色葡萄球菌有较好的抑菌活性,表明试验获得表达pBD-2的大肠杆菌菌株。
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关 键 词: | 猪β-防御素-2 原核表达 融合蛋白 抗菌活性 |
收稿时间: | 2012-08-06 |
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