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棉花SSR多重PCR技术的初步研究和利用
引用本文:马雪霞,王凯,郭旺珍,张天真.棉花SSR多重PCR技术的初步研究和利用[J].分子植物育种,2007,5(5):648-654.
作者姓名:马雪霞  王凯  郭旺珍  张天真
作者单位:南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室,南京,210095
基金项目:教育部长江学者和创新团队发展计划科学技术重大研究项目
摘    要:简单重复序列(simple sequences repeat,SSR)具有数量丰富、高度多态、共显性等优点,是一种极具实用价值的标记,目前已成为研究种质资源遗传多样性、基因组作图的首选标记.SSR多重PCR扩增法可同时完成多个标记检测,具有高效、经济、快捷的特点,并保持了单一SSR引物扩增的高度敏感性和准确性.本文选取6对SSR引物,配成三组SSR两重PCR反应,并设置五种不同反应体系以探索PCR反应体系对其影响,以单一引物PCR扩增为对照,对用于构建亚洲棉(Gossypium arboreum)遗传图谱所用的亲本、F1及F2群体单株的DNA模板进行多重PCR探索、分析;另外,在扩增产物的电泳检测时,结合银染技术,试验了单一引物PCR扩增产物在同一泳道同时上样和先后分时上样的两重检测的方法,以期对这种方法进行多态性位点检测的效果进行评价.结果表明,即使采用与单一引物PCR相同的反应体系,两重PCR扩增也可获得与之相同的多态性产物;而两重检测法的结果亦显示出与相应的单引物检测到的相应的多态性位点,能准确反映单引物所能达到的检测效果,因而为SSR的多重PCR和扩增后多重检测的技术在高效的遗传图谱构建工作中进一步应用提供实验依据.

关 键 词:棉花  SSR  多重扩增  多重检测

Multiple SSR-PCR Techniques and their Application in Cotton
Ma Xuexia,Wang Kai,Guo Wangzhen,Zhang Tianzhen.Multiple SSR-PCR Techniques and their Application in Cotton[J].Molecular Plant Breeding,2007,5(5):648-654.
Authors:Ma Xuexia  Wang Kai  Guo Wangzhen  Zhang Tianzhen
Abstract:
Keywords:Cotton  SSR  Multiple-PCR  Multiple detection
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