| 美洲棉铃虫CYP321A1基因启动子区萤火虫荧光素酶报告基因载体的构建及活性测定 |
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| 引用本文： | 张春妮,张雅林.美洲棉铃虫CYP321A1基因启动子区萤火虫荧光素酶报告基因载体的构建及活性测定[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2011,39(3):87-91. |
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| 作者姓名： | 张春妮 张雅林 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学 植保资源与病虫害治理教育部重点实验室,植物保护学院;西北农林科技大学 植保资源与病虫害治理教育部重点实验室,植物保护学院 |
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| 基金项目： | 国家公益性行业（农业）科研专项(200903052)；陕西省“13115”科技创新工程重大科技专项（2007ZDKG-14）； 西北农林科技大学回国人员科研启动项目（Z111020916） |
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| 摘 要： | 【目的】构建美洲棉铃虫细胞色素P450基因CYP321 A1启动子区萤火虫荧光素酶报告基因载体,为探索CYP321 A1基因的转录调控机制奠定基础。【方法】设计合成PCR引物,从美洲棉铃虫基因组DNA中扩增并克隆CYP321 A1基因的启动子区;将克隆的启动子片段插入载体pGL3-basic构建萤火虫荧光素酶报告基因载体p(-1 470/+64);用p(-1 470/+64)转染美洲棉铃虫脂肪体细胞系BCIRL-HzFB33,并用双荧光素酶报告基因检测系统分析该启动子活性。【结果】p(-1 470/+64)经双酶切、PCR鉴定及DNA测序分析鉴定准确无误;通过转染细胞和荧光素酶活性分析,证实所构建的重组载体p(-1 470/+64)可以反映CYP321 A1启动子活性;黄酮、花椒毒素处理极显著地增强了重组载体p(-1 470/+64)的荧光活性。【结论】成功构建了美洲棉铃虫细胞色素P450基因CYP321 A1启动子区萤火虫荧光素酶报告基因载体,CYP321A1启动子活性可以被植物次生物质黄酮、花椒毒素高度诱导。
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| 关 键 词： | 美洲棉铃虫 细胞色素P450 CYP321 A1 启动子 荧光素酶报告基因载体 |
| 收稿时间： | 2010/8/18 0:00:00 |
Construction and functional identification of the luciferase reporter vectors of CYP321A1 gene promoter |
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| ZHANG Chun-ni,ZHANG Ya-lin.Construction and functional identification of the luciferase reporter vectors of CYP321A1 gene promoter[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2011,39(3):87-91. |
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| Authors: | ZHANG Chun-ni ZHANG Ya-lin |
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| Institution: | ZHANG Chun-ni,ZHANG Ya-lin (Key Laboratory of Plant Protection Resources and Pest Management,Ministry of Education,College of Plant Protection,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Helicoverpa zea cytochrome P450 CYP321A1 promoter luciferase reporter gene plasmid |
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