| 草兔卵透明带蛋白2的克隆与原核表达 |
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| 引用本文： | 周智敏,韩崇选.草兔卵透明带蛋白2的克隆与原核表达[J].西北林学院学报,2016,31(2):181-187. |
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| 作者姓名： | 周智敏 韩崇选 |
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| 作者单位： | （西北农林科技大学 林学院，陕西 杨陵 712100） |
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| 摘 要： | 哺乳动物卵透明带蛋白具有极强抗原性，产生的抗卵透明带蛋白抗体可以有效阻碍精卵结合。为了探究草兔卵透明带2 (zona pellucida 2，ZP2)蛋白抗原性，以及定位抗原表位。根据GenBank上欧洲兔的卵透明带2基因序列，设计5′端磷酸化的反转录引物用于合成特异cDNA作为模板，通过普通PCR扩增草兔ZP2基因。测序获得的2 184 bp序列比对成功后，预测其信号肽和跨膜区域分别位于ZP235-56和ZP2698-717。将克隆获得954 bp的hZP2基因连入pET-28a(+)的EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点之间，成功构建了重组原核表达载体pET-28a-hZP2后转化大肠杆菌（Escherichia coli，E.coli）BL21。重组的E.coli BL21经诱导后表达41.17 kD可溶性的hZP2融合蛋白，经优化诱导表达体系后，确定较好的诱导条件是37℃下 0.7 mmol·L-1 IPTG诱导15 h。经Western blot鉴定，结果表明相对于表达ZP2大片段基因，hZP2融合蛋白表达量明显提高。
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| 关 键 词： | 卵透明带 草兔 抗原表位 ZP2ZP2 诱导表达 |
Gene Cloning and Prokaryotic Expression of Lepus Capensis Zona Pellucida Protein 2 |
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| ZHOU Zhi-min,HAN Chong-xuan. Gene Cloning and Prokaryotic Expression of Lepus Capensis Zona Pellucida Protein 2[J].Journal of Northwest Forestry University,2016,31(2):181-187. |
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| Authors: | ZHOU Zhi-min HAN Chong-xuan |
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| Institution: | （College of Forestry，Northwest A&F University，Yangling，Shaanxi 712100，China） |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | zona pellucida Lepus Capensis Lepus Capensis epitope ZP2 ZP2 optimum expression |
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