| 新疆多浪羊IFN-γ基因地高辛探针的标记与敏感性检测 |
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| 引用本文： | 艾东旭,徐宏伟,李 玮,张 晶,宋显明,李莲瑞.新疆多浪羊IFN-γ基因地高辛探针的标记与敏感性检测[J].西北农业学报,2016,25(10):1436-1441. |
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| 作者姓名： | 艾东旭 徐宏伟 李 玮 张 晶 宋显明 李莲瑞 |
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| 作者单位： | （1. 塔里木大学 生命科学学院，新疆阿拉尔 843300; 2. 新疆兵团塔里木畜牧科技重点实验室，新疆阿拉尔 843300; 3.塔里木大学 动物科学学院，新疆阿拉尔 843300） |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（30960277）；新疆生产建设兵团应用基础研究（2007JC07）；塔里木大学校长基金（TDZKCX201401）。 |
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| 摘 要： | 为获得多浪羊IFN-γ地高辛探针,并对其标记效率进行检测。将多浪羊pMD-18T-IFN-γ克隆菌进行PCR扩增,经切胶回收及目的基因浓缩后获得目的基因IFN-γ,然后用地高辛标记和检测试剂盒对IFN-γ基因进行标记,获得IFN-γ地高辛探针。IFN-γ的PCR扩增产物经8g/L琼脂糖电泳分离后转移至Hybond N+膜,膜上显影后进行敏感性检测并计算探针质量浓度,结果显示,IFN-γ地高辛探针在杂交液中的质量浓度为30μg/L。Southern杂交显示,Hybond N+膜上有IFN-γ基因的双链DNA,且浓缩后的DNA(2.5μg)标记的特异性探针质量浓度较高,可以在Hybond N+膜上呈现出清晰的杂交条带,证明获得的探针质量浓度符合要求。
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| 关 键 词： | 多浪羊 IFN-γ基因 地高辛 探针标记 检测 |
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