| 苹果蠹蛾颗粒体病毒(CpGV)GP37蛋白在Bac-to-Bac系统中的表达和亚细胞定位 |
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| 引用本文： | 刘向阳,孙修炼,张忠信,周琳.苹果蠹蛾颗粒体病毒(CpGV)GP37蛋白在Bac-to-Bac系统中的表达和亚细胞定位[J].农业生物技术学报,2014(5). |
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| 作者姓名： | 刘向阳 孙修炼 张忠信 周琳 |
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| 作者单位： | 河南农业大学植物保护学院;河南省新型农药创制与应用重点实验室;中国科学院武汉病毒研究所; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(No.31301713);河南省教育厅科学技术研究重点项目(No.14A210024) |
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| 摘 要： | 苹果蠹蛾颗粒体病毒(Cydia pomonella granulovirus,CpGV)是防治苹果蠹蛾最重要的生物药剂之一,为探寻苹果CpGV GP37蛋白的增效机制,本研究利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,将苹果CpGV gp37基因和绿色荧光蛋白基因(egfp)以N端或C端融合的方式插入苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒(Autographa californica multiple nucleocapsid NPV,AcMNPV)基因组中,获得重组的杆状病毒质粒(bacmid),转染昆虫细胞Sf9,然后进行Western blot检测。结果显示,检测到GP37和EGFP的融合蛋白(vAcEGFPGP37、vAcGP37EGFP)和非融合蛋白(vAcGP37、vAcEGFP)都得到了高效表达;用激光共聚焦显微镜观察蛋白的亚细胞定位情况,融合GP37的EGFP主要聚集在细胞质中,没有融合GP37的EGFP遍布整个细胞,说明CpGV GP37蛋白定位于细胞质中。本实验研究了CpGV GP37蛋白的真核表达,为该蛋白的后续研究提供了条件;而该蛋白的亚细胞定位研究,不仅为CpGV GP37蛋白增效机制的研究提供了基础资料,同时丰富了杆状病毒GP37蛋白的相关理论。
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| 关 键 词： | 苹果蠹蛾颗粒体病毒(CpGV) GP蛋白 Bac-to-Bac杆状病毒表达系统 真核表达 亚细胞定位 |
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