含T细胞表位的猪细小病毒VP2基因核酸疫苗的构建及其在小鼠中的免疫原性分析 |
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引用本文: | 孙彦欣,左玉柱,李建辉,范京惠,裴丽华,杨震,王晨枫.含T细胞表位的猪细小病毒VP2基因核酸疫苗的构建及其在小鼠中的免疫原性分析[J].中国预防兽医学报,2013(3):222-226. |
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作者姓名: | 孙彦欣 左玉柱 李建辉 范京惠 裴丽华 杨震 王晨枫 |
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作者单位: | 河北农业大学动物科技学院 |
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基金项目: | 河北省自然科学基金(C2009000631);国家自然科学基金项目(31101847) |
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摘 要: | 为研制猪细小病毒(PPV)主要保护性抗原VP2基因核酸疫苗,本研究将猪圆环病毒(PCV)编码T细胞表位P21多肽的序列连接于PPV VP2基因的5’端克隆于pcDNA3.1(+)中,构建重组表达质粒pcDNA-P21-VP2,并将其经磷酸钙介导转染HEK293T细胞中检测其表达情况。SDS-PAGE和western blot检测表明,P21-VP2重组蛋白获得了有效的表达,其分子量约为67 ku。将pcDNA-P21-VP2肌肉注射BALB/c小鼠后,采用ELISA方法检测其抗体,并采用MTT法检测小鼠免疫后脾脏淋巴细胞的增殖活性。试验结果表明,重组质粒能够有效诱导小鼠产生明显的抗体反应,并且对淋巴细胞的增殖反应有明显促进作用。该实验结果为研制有效的PPV核酸疫苗奠定了基础。
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关 键 词: | 猪细小病毒VP2基因 猪圆环病毒P21表位序列 核酸疫苗 |
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