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H6亚型禽流感病毒一步法RT-PCR检测方法的建立
引用本文:谭丹,邓国华,施建忠,刘道新,陈化兰.H6亚型禽流感病毒一步法RT-PCR检测方法的建立[J].中国预防兽医学报,2013,35(2):142-145.
作者姓名:谭丹  邓国华  施建忠  刘道新  陈化兰
作者单位:1. 湖南农业大学动物医学院,湖南长沙410128;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室,黑龙江哈尔滨150001
2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室,黑龙江哈尔滨,150001
3. 湖南农业大学动物医学院,湖南长沙,410128
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划)资助项目(2011CB505001)
摘    要:为快速检测临床样品中的H6亚型禽流感病毒(AIV),本研究通过分析流感数据库中H6亚型的HA基因,在HA保守区设计一对引物,建立一种用于扩增H6亚型禽流感病毒HA基因的一步法RT-PCR检测方法,扩增片段为327bp.采用该方法对H6亚型AIV的尿囊液10倍倍比稀释样品进行检测,结果显示最低检出量为102.5 EID50/mL.用该方法检测其他亚型AIV和鸡新城疫病毒等病原均为阴性,具有良好的特异性.对H6AIV人工感染鸡的咽喉、泄殖腔棉拭子样品进行一步法RT-PCR检测,并与病毒分离进行比较,显示该方法对棉拭子的检测极限可达102.5 EID50/mL,同时利用该方法及病毒分离对临床样品进行检测,两者检测结果一致.实验结果表明该RT-PCR方法具有较好的特异性、敏感性,可以应用于临床样品的实验室检测.

关 键 词:禽流感病毒  一步法RT-PCR  H6亚型

Development of one step RT-PCR technique for detection of H6 subtype avian influenza virus
TAN Dan , DENG Guo-hua , SHI Jian-zhong , LIU Dao-xin , CHEN Hua-lan.Development of one step RT-PCR technique for detection of H6 subtype avian influenza virus[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2013,35(2):142-145.
Authors:TAN Dan  DENG Guo-hua  SHI Jian-zhong  LIU Dao-xin  CHEN Hua-lan
Institution:1.Hunan Agricultural University,Changsha 410128,China;2.State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,Animal Influenza Laboratory of Ministry of Agricultural,Harbin Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Harbin 150001,China)
Abstract:
Keywords:
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