| 刺梨ISSR-PCR反应体系的建立和优化 |
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| 引用本文： | 王小平,何波,向素琼,汪卫星,何桥,郭启高,李晓林,梁国鲁.刺梨ISSR-PCR反应体系的建立和优化[J].西南园艺,2009(3):65-67. |
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| 作者姓名： | 王小平 何波 向素琼 汪卫星 何桥 郭启高 李晓林 梁国鲁 |
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| 作者单位： | 西南大学园艺园林学院,重庆400715 |
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| 摘 要： | 以刺梨为试材，对影响ISSR．PCR扩增结果的主要影响因素包括Mg^2＋、TaqDNA聚合酶、dNTPs、引物、模版DNA的浓度及引物退火温度进行了优化筛选。确立了适合刺梨ISSR．PCR分析的最佳反应体系，即20μL反应体系中各组分浓度分别为：10×buffer 2．0μL，Mgz＋1．875mInoI／L。TaqDNA聚合酶1．0U，dNTPs0．1mmol／L，引物2．0μmol／L，模板DNA20ng。PCR扩增程序：94。c预变性5min，94℃变性1min，48℃退火温度45S，72℃延伸1min，34个循环，72℃后延伸6min。利用优化体系对3个刺梨品种进行体系稳定性检测，结果表明该优化体系的重复性和稳定性良好。
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| 关 键 词： | 刺梨 ISSR 优化体系 |
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