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牛型布氏杆菌GroEL的克隆表达及其生物学特性研究
引用本文:韩先干,何随彬,胡青海,丁铲,于圣青.牛型布氏杆菌GroEL的克隆表达及其生物学特性研究[J].中国动物传染病学报,2010,18(5).
作者姓名:韩先干  何随彬  胡青海  丁铲  于圣青
作者单位:1. 中国农业科学院上海兽医研究所,上海,200241
2. 南京农业大学动物医学院,南京,210095
基金项目:国家"973"项目,中央级科研院所公益性研究专项
摘    要:根据已发表的牛型布氏杆菌(Brucella abrotus)基因序列设计一对特异性引物,以B.abrotusA19株基因组为模板,通过PCR扩增GroEL基因,经T-A克隆后进行序列测定和分析。结果表明,GroEL基因全长1 641bp,编码546个氨基酸。将GroEL定向克隆至表达载体pET32a中,构建重组表达质粒pET32a-LGroEL,然后转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下成功获得重组表达蛋白His-GroEL,大小为81 kDa。经Western blot检测,牛布氏杆菌阳性血清中有GroEL抗体存在,表明该蛋白具有免疫原性。对重组表达蛋白His-GroEL进行酶促活性检测,结果表明该蛋白在体外具有催化ATP水解的酶活性和促进乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)复性的功能。

关 键 词:布氏杆菌  表达  酶活检测

CLONING, EXPRESSION AND BIOLOGICAL PROPERTIES OF GROEL GENE OF BRUCELLA ABROTUS
HAN Xian-gan,HE Sui-bin,HU Qing-hai,DING Chan,YU Sheng-qing.CLONING, EXPRESSION AND BIOLOGICAL PROPERTIES OF GROEL GENE OF BRUCELLA ABROTUS[J].Chinese Journal of Animal Infectious Diseases,2010,18(5).
Authors:HAN Xian-gan  HE Sui-bin  HU Qing-hai  DING Chan  YU Sheng-qing
Abstract:
Keywords:GroEL
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