| Bt(Cry1F)毒素多克隆抗体制备及其检测应用 |
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| 引用本文： | 徐重新,程诚,张霄,刘媛,仲建锋,胡晓丹,张存政,刘贤金.Bt(Cry1F)毒素多克隆抗体制备及其检测应用[J].农产品质量与安全,2016(4):47-51. |
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| 作者姓名： | 徐重新 程诚 张霄 刘媛 仲建锋 胡晓丹 张存政 刘贤金 |
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| 作者单位： | 江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所，省部共建国家重点实验室培育基地---江苏省食品质量安全重点实验室，农业部农产品质量安全控制技术与标准重点实验室，南京210014 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目“食品中Bt Cry素毒检测用广谱抗体的制备研究”(编号31371778)，省部共建国家重点实验室培育基地---江苏省食品质量安全重点实验室自主研究课题“新型高效杀虫肽功能材料筛选与制备”(编号3201604)支持。 |
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| 摘 要： | 通过免疫新西兰大白兔,制备并纯化Bt(Cry1F)毒素多克隆抗体,建立针对Cry1F毒素检测的免疫学分析方法,用于室内分析毒素在农产品和土壤中的残留情况。采用皮下注射法,经4次级联免疫,获得免疫血清效价为1:2 500 000,经柱纯化后,测得抗体浓度为4.70 mg/m L;并以其建立的针对Cry1F毒素的间接非竞争时间分辨荧光免疫分析方法(TRFIA),测得线性检测范围在0.04~2 000 ng/m L,最低检测灵敏度为0.03 ng/m L,对5种供试毒素类似物(Cry1Ab、Cry1Ac、Cry1B、Cry1C、Cry2A)均具一定交叉识别能力。分别以稻米和黄土为基质,进行添加回收试验,测得批内、批间的稳定性和重复性均达到室内仪器检测要求。
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| 关 键 词： | Bt毒素 Cry1F毒素 多克隆抗体 时间分辨荧光免疫分析 |
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