| 草鱼呼肠孤病毒HZ08株VP4蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 |
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| 引用本文： | 曾伟伟,王 庆,王英英,石存斌,吴淑勤.草鱼呼肠孤病毒HZ08株VP4蛋白单克隆抗体的制备及鉴定[J].水产学报,2013,37(3):450-456. |
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| 作者姓名： | 曾伟伟 王 庆 王英英 石存斌 吴淑勤 |
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| 作者单位： | 中国水产科学研究院珠江水产研究所,农业部渔用药物创制重点实验室,广东省免疫技术重点实验室,广东广州 510380 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31202026)；农业公益性行业科研专项(200803013) |
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| 摘 要： | 为了建立针对草鱼呼肠孤病毒(GCRV)流行株的血清学检测方法,实验构建了能高效表达GCRV HZ08株主要衣壳蛋白VP4的重组表达载体pET32a-S6,利用纯化的VP4重组蛋白免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与SP2/O细胞融合,经过克隆和筛选,获得3株能稳定分泌抗VP4重组蛋白单克隆抗体(monoclonal antibody,MAb)的杂交瘤细胞,分别命名为2C2、2F3和5E5.抗体经亚型鉴定均为IgG1,轻链为K链；间接ELISA试验证明,3株杂交瘤细胞分泌的MAb可特异性识别GCRV-HZ08,与GSRV,ISKNV,IHNV均无交叉反应.选择2C2作为腹水生产细胞株,免疫小鼠后腹水ELISA效价为1∶720 000；IFA和Western-blotting结果显示,这株杂交瘤细胞分泌的MAb能够特异性识别GCRV-HZ08病毒粒子.本实验制备的MAb具有良好的生物学特性,为GCRV流行株血清学检测方法的建立及VP4蛋白相关功能研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | 草鱼呼肠孤病毒 VP4蛋白 单克隆抗体 |
| 收稿时间： | 11/3/2012 4:38:08 PM |
| 修稿时间： | 2012/12/24 0:00:00 |
Preparation and identification of monoclonal antibody against grass carp reovirus HZ-08 VP4 protein |
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| Zeng Wei-Wei,Wang Qing,Wang Ying-ying,Shi Cun-Bin and Wu Shu-Qin.Preparation and identification of monoclonal antibody against grass carp reovirus HZ-08 VP4 protein[J].Journal of Fisheries of China,2013,37(3):450-456. |
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| Authors: | Zeng Wei-Wei Wang Qing Wang Ying-ying Shi Cun-Bin and Wu Shu-Qin |
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| Institution: | Pearl River Fishery Research Institute,Chinese Academy of Fishery Sciences,Pearl River Fishery Research Institute,Chinese Academy of Fishery Sciences,Pearl River Fishery Research Institute,Chinese Academy of Fishery Sciences,Pearl River Fishery Research Institute,Chinese Academy of Fishery Sciences,Pearl River Fishery Research Institute,Chinese Academy of Fishery Sciences |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | grass crap reovirus virus VP4 protein monoclonal antibody |
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