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| 半滑舌鳎生长因子midkine的定点改造及原核表达 | |
| 引用本文： | 王亚楠,刘旭东,穆琳琳,刘志鹏,李春梅,于海洋,张全启.半滑舌鳎生长因子midkine的定点改造及原核表达[J].水产学报,2013,37(3):330-336. |
| 作者姓名： | 王亚楠 刘旭东 穆琳琳 刘志鹏 李春梅 于海洋 张全启 |
| 作者单位： | 1. 中国海洋大学海洋生命学院,海洋生物遗传学与育种教育部重点实验室,山东青岛266003;青岛市海洋与渔业局,山东青岛 266071 2. 中国海洋大学海洋生命学院,海洋生物遗传学与育种教育部重点实验室,山东青岛266003;国家海洋局北海环境监测中心,山东青岛 266033 3. 中国海洋大学海洋生命学院,海洋生物遗传学与育种教育部重点实验室,山东青岛266003 |
| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划（2012AA100802, 2012AA100801） |
| 摘 要： | 为进一步研究半滑舌鳎midkine(MK)成熟肽活性与功能,对半滑舌鳎生长因子MK成熟肽进行定点改造及原核表达.根据大肠杆菌偏爱密码子的特点,实验利用SOEing PCR法对半滑舌鳎MK成熟肽进行定点突变.将改造后的半滑舌鳎成熟肽MK克隆到载体质粒pET32a(+),构建原核表达载体pET32a(+)-MK,并转化至大肠杆菌BL21(DE3) pLysS菌株中.SDS-PAGE结果显示,与对照组相比,经IPTG诱导表达后半滑舌鳎重组蛋白MK存在于大肠杆菌上清液中,产物相对分子质量约为33 ku.研究表明,本实验对半滑舌鳎生长因子midkine成功进行了定点改造,原核表达质粒成功构建并在大肠杆菌中高效表达,且主要以可溶形式存在. |
| 关 键 词： | 半滑舌鳎 midkine 原核表达 融合蛋白 |
| 收稿时间： | 2/8/2012 9:54:48 AM |
| 修稿时间： | 2012/12/23 0:00:00 |
The site-directed mutagenesis and prokaryotic expression of midkine gene in Cynoglossus semilaevis |
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| WANG Ya-nan,LIU Xu-dong,MU Lin-lin,LIU Zhi-peng,LI Chun-mei,YU Hai-yang and ZHANG Quan-qi.The site-directed mutagenesis and prokaryotic expression of midkine gene in Cynoglossus semilaevis[J].Journal of Fisheries of China,2013,37(3):330-336. | |
| Authors: | WANG Ya-nan LIU Xu-dong MU Lin-lin LIU Zhi-peng LI Chun-mei YU Hai-yang and ZHANG Quan-qi |
| Institution: | Ocean and Fishery Bureau of Qingdao,North China Sea Environment Monitoring Center, SOA,College of Marine Life Science,Ocean University of China,Key Laboratory of Marine Genetics and Breeding,Ministry of Education,College of Marine Life Science,Ocean University of China,Key Laboratory of Marine Genetics and Breeding,Ministry of Education,College of Marine Life Science,Ocean University of China,Key Laboratory of Marine Genetics and Breeding,Ministry of Education,College of Marine Life Science,Ocean University of China,Key Laboratory of Marine Genetics and Breeding,Ministry of Education,College of Marine Life Science,Ocean University of China,Key Laboratory of Marine Genetics and Breeding,Ministry of Education |
| Abstract: | |
| Keywords: | Cynoglossus semilaevis midkine prokaryotic expression recombinant protein |
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