| 日本结缕草衰老叶片全长cDNA文库构建及酵母单杂交筛选验证 |
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| 引用本文： | 滕珂,檀鹏辉,范希峰,岳跃森,姜红岩,武菊英.日本结缕草衰老叶片全长cDNA文库构建及酵母单杂交筛选验证[J].草地学报,2019,27(6):1486-1493. |
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| 作者姓名： | 滕珂 檀鹏辉 范希峰 岳跃森 姜红岩 武菊英 |
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| 作者单位： | 1. 北京市农林科学院, 北京草业与环境研究发展中心, 北京 100097;2. 北京林业大学, 草业与草原学院, 北京 100083 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;科技创新能力建设专项;科技创新能力建设专项;北京市科技计划 |
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| 摘 要： | 脱镁叶绿素脱镁叶绿酸水解酶（Pheophytin pheophorbide hydrolase，PPH）是叶绿素降解过程中的一个关键酶，目前有关日本结缕草（Zoysia japonica）PPH基因的上游调控机制仍不是十分清楚，筛选日本结缕草ZjPPH1基因上游转录因子可以为延长绿期延缓衰老提供理论依据。本研究利用Clontech的SMRT cDNA合成技术构建一个日本结缕草衰老叶片的高质量全长cDNA文库，其滴度为2.0×106 cfu·mL-1，插入片段平均长度大于1 kb，cDNA片段插入重组率为100%。该文库的完整性较高，可涵盖绝大多数基因信息，为酵母单杂交筛选奠定了基础。利用酵母单杂交技术，筛选到可与ZjPPH1基因启动子片段结合的候选菌落42个，并对20个候选基因进行测序和生物信息学分析，初步筛选到6个参与细胞生长和衰老过程的重要候选基因，为进一步探索ZjPPH1基因在日本结缕草衰老和叶绿素降解中的上游调控机制提供了理论支撑。
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| 关 键 词： | 日本结缕草 全长cDNA文库 酵母单杂交 脱镁叶绿素脱镁叶绿酸水解酶基因 |
| 收稿时间： | 2019-06-26 |
Generating of a Full Length cDNA Library Using Senescence Leaves of Zoysia japonica and Yeast One-hybrid Screening Validation |
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| TENG Ke,TAN Peng-hui,FAN Xi-feng,YUE Yue-sen,JIANG Hong-yan,WU Ju-ying.Generating of a Full Length cDNA Library Using Senescence Leaves of Zoysia japonica and Yeast One-hybrid Screening Validation[J].Acta Agrestia Sinica,2019,27(6):1486-1493. |
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| Authors: | TENG Ke TAN Peng-hui FAN Xi-feng YUE Yue-sen JIANG Hong-yan WU Ju-ying |
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| Institution: | 1. Beijing Research and Development Center for Grass and Environment, Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences, Beijing 100097, China;2. College of Grassland Science, Beijing Forestry University, Beijing 100083, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Zoysia japonica Full length cDNA library Yeast one-hybrid screening PPH |
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