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油茶ISSR反应体系建立及优化
引用本文:温强,叶金山,雷小林,江梅,黄莉莉,江香梅,徐林初.油茶ISSR反应体系建立及优化[J].中南林业科技大学学报,2006,26(6):22-26.
作者姓名:温强  叶金山  雷小林  江梅  黄莉莉  江香梅  徐林初
作者单位:江西省植物生物技术重点实验室 江西南昌330032
摘    要:以改进的CTAB高盐法提取油茶嫩叶总DNA,进行简单重复序列间扩增(ISSR)分析,分别测试了退火温度、模板DNA浓度、M g2+浓度、dNTP s浓度、T aqDNA聚合酶用量和是否加入去离子甲酰胺对反应结果的影响.油茶ISSR分析的最适反应体系为:在20μL PCR反应体积中,含20 ng模板DNA,2.5 mm o l.L-1M gC l2,0.2 mm o l.L-1dNTP s,1UT aqDNA聚合酶,0.5pm o l.μL-1引物,1%去离子甲基酰胺.扩增程序为:94℃预变性2 m in;94℃变性30 s,52℃退火30 s,72℃延伸90 s,反应38个循环;最后在72℃延伸7 m in.

关 键 词:林学  油茶  反应条件  优化
文章编号:1000-2502(2006)06-0022-05
修稿时间:2006年8月24日

Study on the Inter-simple Sequence Repeat Condition of Camellia oleifera
WEN Qiang,YE Jin-shan,LEI Xiao-lin,JIANG Mei,HUANG Li-li,JIANG Xiang-mei,XU Lin-chu.Study on the Inter-simple Sequence Repeat Condition of Camellia oleifera[J].Journal of Central South Forestry University,2006,26(6):22-26.
Authors:WEN Qiang  YE Jin-shan  LEI Xiao-lin  JIANG Mei  HUANG Li-li  JIANG Xiang-mei  XU Lin-chu
Abstract:
Keywords:ISSR
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