| 斑点叉尾鮰铁调素成熟肽在毕赤酵母中的表达及其抑菌活性 |
| |
| 引用本文： | 宋长丰,陶妍,赵冬梅,沈彦萍.斑点叉尾鮰铁调素成熟肽在毕赤酵母中的表达及其抑菌活性[J].农业生物技术学报,2015,23(3):380-387. |
| |
| 作者姓名： | 宋长丰 陶妍 赵冬梅 沈彦萍 |
| |
| 作者单位： | 1. 上海海洋大学食品学院/上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心,上海,201306
2. 上海沈李科工贸有限公司,上海,200072 |
| |
| 基金项目： | 上海市教育委员会产学研项目，农业部都市农业(南方)重点实验室开放基金 |
| |
| 摘 要： | 铁调素(hepcidin)是一种在动物肝脏中特异表达的碱性小分子抗菌肽,在机体免疫系统中发挥重要作用,被认为是抗生素的理想替代品。本研究根据毕赤酵母(Pichia pastoris)偏爱性密码子人工合成斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)hepcidin成熟肽基因(mCH)。通过PCR方法在mCH的5’端和3’端分别引入EcoRⅠ和NotⅠ酶切位点,扩增到的目的片段与表达载体p PIC9K连接构建重组表达载体p PIC9K-mCH后,转化至毕赤酵母GS115细胞;以不同浓度梯度的G418筛选高拷贝转化子,1.0%甲醇、30℃、pH6.0诱导表达72 h,获得重组体mCH。结果显示,斑点叉尾鮰hepcidin成熟肽区域含25个残基,8个保守的半胱氨酸残基位于成熟肽的羧基端,表明该区域对hepcidin的抗菌活性具有重要作用。Tricine-SDS-PAGE分析显示,分泌表达的重组体mCH的分子量约为3 800D,通过阳离子交换层析获得纯化的mCH。抑菌实验表明,重组体抗菌肽mCH对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和大肠杆菌(Escherichia coli)有抑菌活性。本研究首次实现了斑点叉尾鮰hepcidin成熟肽在毕赤酵母中的重组DNA表达,为其产业化制备提供了重要的基础资料。
|
| 关 键 词： | 斑点叉尾鮰 铁调素成熟肽(mCH) 毕赤酵母 重组表达 抗菌活性 |
Expression of Channel Catfish (Ictalurus punctatus) Hepcidin Mature Peptide in Pichia pastoris and Its Antibacterial Activity |
| |
| SONG Chang-Feng,TAO Yan,ZHAO Dong-Mei,SHEN Yan-Ping.Expression of Channel Catfish (Ictalurus punctatus) Hepcidin Mature Peptide in Pichia pastoris and Its Antibacterial Activity[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2015,23(3):380-387. |
| |
| Authors: | SONG Chang-Feng TAO Yan ZHAO Dong-Mei SHEN Yan-Ping |
| |
| Institution: | SONG Chang-Feng;TAO Yan;ZHAO Dong-Mei;SHEN Yan-Ping;College of Food Science and Technology/Shanghai Engineering Research Center of Aquatic- Product Processing & Preservation, Shanghai Ocean University;Shanghai Shenli Division Industry and Trade Co.,Ltd; |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Channel catfish Hepcidin mature peptide (mCH) Pichia pastoris Recombinant expression Antibacterial activity |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
