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中华鼢鼠卵透明带3基因(mZP3)真核表达载体的构建及其在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中的表达
引用本文:张冬辉,郑雪莉,李昊,周智敏,吴景龙,隋丹丹,韩崇选.中华鼢鼠卵透明带3基因(mZP3)真核表达载体的构建及其在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中的表达[J].农业生物技术学报,2015,23(3):408-413.
作者姓名:张冬辉  郑雪莉  李昊  周智敏  吴景龙  隋丹丹  韩崇选
作者单位:西北农林科技大学鼠害治理研究中心,杨凌,712100
基金项目:国家林业公益性行业科研专项
摘    要:卵透明带3(zona pellucida 3,ZP3)蛋白是精卵结合最重要的受体。为了构建中华鼢鼠(Myospalax fontanierii)卵透明带3(mZP3)基因真核表达载体,本研究利用PCR方法得到加入酶切位点的mZP3片段,并将其克隆到真核表达载体pEGFP-N1上,体外转染中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cell,CHO cell)和尾静脉注射昆明小鼠(Mus musculus)体内,利用RT-PCR和Western bolt技术检测其表达情况。双酶切和基因测序鉴定结果表明,所构建的表达载体是pEGFP-mZP3;倒置显微镜观察到发绿色荧光的成功转染的细胞;RT-PCR和Western bolt检测结果表明,目的基因mZP3在CHO细胞中成功表达,并且小鼠肝脏内也检测到目的基因。研究结果表明,卵透明带3基因能够在CHO真核细胞内表达,为后期基因疫苗防治中华鼢鼠提供依据。

关 键 词:中华鼢鼠  卵透明带3(ZP3)  真核表达  免疫不育  蛋白免疫印迹

Construction of Eukaryotic Expression Vector for Myospalax fontanierii Zona Pellucida 3 Gene (mZP3) and Its Expression in Chinese Hamster Ovary (CHO) Cell
ZHANG Dong-Hui,ZHENG Xue-Li,LI Hao,ZHOU Zhi-Min,WU Jing-Long,SUI Dan-Dan,HAN Chong-Xuan.Construction of Eukaryotic Expression Vector for Myospalax fontanierii Zona Pellucida 3 Gene (mZP3) and Its Expression in Chinese Hamster Ovary (CHO) Cell[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2015,23(3):408-413.
Authors:ZHANG Dong-Hui  ZHENG Xue-Li  LI Hao  ZHOU Zhi-Min  WU Jing-Long  SUI Dan-Dan  HAN Chong-Xuan
Institution:ZHANG Dong-Hui;ZHENG Xue-Li;LI Hao;ZHOU Zhi-Min;WU Jing-Long;SUI Dan-Dan;HAN Chong-Xuan;Research Center of Rodent Pest Management,Northwest Agriculture&Forestry University;
Abstract:
Keywords:Myospalax fontanierii  Zona pellucida 3 (ZP3)  Eukaryotic expression  Immunocontraception  Western blot
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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