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| 黑腹果蝇抗真菌肽Drs及其同系物基因的原核表达与蛋白纯化研究 | |
| 引用本文： | 杨婉莹,温硕洋,邓小娟,叶明强,夏庆友,曹阳,黄亚东.黑腹果蝇抗真菌肽Drs及其同系物基因的原核表达与蛋白纯化研究[J].中国农业科学,2007,40(2):391-398. |
| 作者姓名： | 杨婉莹 温硕洋 邓小娟 叶明强 夏庆友 曹阳 黄亚东 |
| 作者单位： | 1. 华南农业大学动物科学学院蚕丝科学系,广州,510642 2. 华南农业大学资源环境学院昆虫学系,广州,510642 3. 西南大学蚕学与生物技术学院,农业部蚕桑学重点实验室,重庆,4007162 4. 曁南大学医药生物技术研究开发中心,广州,510632 |
| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划);国家自然科学基金;广东省自然科学基金;广东省科技计划 |
| 摘 要： | 【目的】Drosomycin（Drs）是从黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)中鉴定发现的对丝状真菌有广谱抗性的抗真菌肽因子,此外，在黑腹果蝇基因组中，还存在另外6条Drs同系物的基因序列，对它们推导的氨基酸序列具有与Drs相同的保守位点和CSαβ模体结构。为鉴定Drs及其6个同系物的抗性功能差异，研究其分子结构与功能的关系，需要对这些同系物基因进行克隆表达，获得有生物学活性的纯化样品。【方法】本文采用PCR分段互补合成的方法准确地获得了Drs同系物基因，并克隆至pET-3C载体上，转化到宿主菌E.coli Origami（DE3）中进行诱导表达，表达产物经阳离子CM SepharoseTM Fast Flow层析、凝胶过滤Sephacryl S-100 High Resolution层析和包涵体的复性及Sephadex G-25脱盐等纯化处理后，进行抑菌活性检测。【结果】经纯化的7个Drs同系物的短肽样品，除Drs-lI外，其它的Drs同系物样品对供试真菌水稻立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)均有较强的抑制作用。【结论】表明本研究中使用的纯化及复性方法对具有多个二硫键的小分子多肽是比较有效的。 |
| 关 键 词： | 黑腹果蝇 抗真菌肽 Drosomycin 同系物 表达 蛋白纯化 |
| 收稿时间： | 2005-12-29 |
| 修稿时间： | 2005-12-29 |
Research on Expression in E.coli and Protein Purification of the Antifungal Peptide Drs and Isoforms from Drosophila melanogaster |
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| YANG Wan-ying,WEN Shuo-yang,DENG Xiao-juan,YE Ming-qiang,XIA Qing-you,CAO Yang,HUANG Ya-dong.Research on Expression in E.coli and Protein Purification of the Antifungal Peptide Drs and Isoforms from Drosophila melanogaster[J].Scientia Agricultura Sinica,2007,40(2):391-398. | |
| Authors: | YANG Wan-ying WEN Shuo-yang DENG Xiao-juan YE Ming-qiang XIA Qing-you CAO Yang HUANG Ya-dong |
| Institution: | 1.Department of Sericulture science, College of Animal science, South China of Agricultural University, Guangzhou 510642; 2.Department of Entomology, College of Natural Resource and Environment, South China Agricultural University, Guangzhou 510642; 3.Key Sericultural Laboratory of Agriculture Ministry, College of Sericulture and Biotechnology, Southwest University, Chongqing, 400716; 4.Biopharmaceutical Research and Development Center, Jinan University, Guangzhou 510632 |
| Abstract: | |
| Keywords: | Drosomycin |
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