| RT-LAMP可视化检测猪瘟病毒及特异性鉴别猪瘟兔化弱毒疫苗 |
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| 引用本文： | 邓显文,谢芝勋,谢志勤,刘加波,庞耀珊,谢丽基,范晴,罗思思,黄莉,黄娇玲,曾婷婷,黄秀琴.RT-LAMP可视化检测猪瘟病毒及特异性鉴别猪瘟兔化弱毒疫苗[J].广西农业科学,2015(2). |
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| 作者姓名： | 邓显文 谢芝勋 谢志勤 刘加波 庞耀珊 谢丽基 范晴 罗思思 黄莉 黄娇玲 曾婷婷 黄秀琴 |
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| 作者单位： | 广西兽医研究所/广西畜禽疫苗新技术重点实验室,南宁,530001 |
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| 基金项目： | 国家百千万人才工程人选专项项目(945200603)；广西科技重大专项项目(1222003-2-4)；广西特聘专家专项项目 |
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| 摘 要： | 【目的】建立可视化检测猪瘟病毒（CSFV）及特异性鉴别猪瘟兔化弱毒疫苗株（HCLV）的逆转录环介导等温扩增技术（RT-LAMP），为临床检测CSFV野毒株及特异性鉴别HCLV毒株提供技术支持。【方法】根据GenBank中CSFV非结构蛋白NS5B基因的保守序列，设计两套针对CSFV和HCLV的特异性引物，并优化RT-LAMP反应条件，同时用LA-320C浊度仪实时监测其浊度变化。【结果】优化的RT-LAMP仅需在63℃水浴锅中反应50 min即可完成检测，且能通过肉眼观察反应液的颜色变化直接判定结果；所有CSFV样本的检测结果均为阳性（翠绿色），其他非CSFV样本的检测结果均为阴性（桔红色），且能特异性鉴别HCLV毒株，与实时浊度监测结果一致。该方法对CSFV和HCLV的最小检测限分别是100和101 copies，敏感度分别是常规RT-PCR的100倍和10倍。【结论】建立的RT-LAMP特异性强、灵敏度高、方法简便，尤其适合基层进行CSFV感染的快速检测及特异性鉴别HCLV，对有效防控CSF具有重要意义。
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| 关 键 词： | 猪瘟病毒(CSFV) 猪瘟兔化弱毒疫苗株(HCLV) RT-LAMP 浊度 特异性 敏感度 |
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