| 青稞AFLP体系的建立及优化 |
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| 引用本文： | 王姗姗,刘小娇,靳玉龙,白婷,朱明霞,王波,张文会,张玉红.青稞AFLP体系的建立及优化[J].现代农业科技,2019(5). |
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| 作者姓名： | 王姗姗 刘小娇 靳玉龙 白婷 朱明霞 王波 张文会 张玉红 |
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| 作者单位： | 西藏自治区农牧科学院农产品开发与食品科学研究所 |
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| 摘 要： | 本文以青稞为材料,对AFLP酶切连接、预扩增、选择性扩增过程进行优化。结果表明,酶切反应条件为DNA模板200 ng、限制性内切酶Eco RI/Mse I 4U、酶切时间4h;连接反应条件为连接温度16℃,T4连接酶3 U,连接时间12 h以上;预扩增反应条件为r Taq聚合酶3 U、dNTP 4 mmol/L、镁离子浓度1.00 mmol/L;选择性扩增反应条件为r Taq聚合酶4 U、d NTP 4 mmol/L、镁离子浓度1.25 mmol/L及预扩产物稀释10倍。利用优化后的AFLP体系,以藏青2000、冬青18这2个供试材料的基因组为模板,从100对引物组合中筛选出10对重复性好、稳定性强、扩增条带清晰、分布均匀、多态性高的引物组合,为青稞种质资源鉴定及遗传多样性分析提供了基础。
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| 关 键 词： | 青稞 AFLP PCR体系优化 引物筛选 |
Establishment and Optimization of AFLP System for Hulless Barley |
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