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| 猪伪狂犬病毒SYBR-GreenⅠ实时定量PCR检测方法的建立 | |
| 引用本文： | 李明凤,魏战勇,郭显坡,贾艳艳,陈红英,王学兵,崔保安.猪伪狂犬病毒SYBR-GreenⅠ实时定量PCR检测方法的建立[J].河南农业大学学报,2009,43(3). |
| 作者姓名： | 李明凤 魏战勇 郭显坡 贾艳艳 陈红英 王学兵 崔保安 |
| 作者单位： | 1. 河南农业大学牧医工程学院,河南郑州,450002;河南省动物性食品安全重点实验室,河南郑州,450002 2. 河南省动物性食品安全重点实验室,河南郑州,450002 3. 河南农业大学牧医工程学院,河南郑州,450002 |
| 基金项目： | 河南省杰出科研人才创新工程项目，河南省重点科技攻关项目 |
| 摘 要： | 利用PCR技术扩增出猪伪狂犬病毒gH基因中187 bp的片段,并克隆到pGEM T栽体上,纯化的质粒作为PCR检测的标准模板,以10倍梯度稀释质粒为标准模板,进行SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR扩增并制作标准曲线.建立了猪伪狂犬病毒的荧光定量PCR检测方法.该方法检测灵敏度可达1.26×102拷贝·μL-1,与猪圆环病毒,猪细小病毒,猪繁殖与呼吸综合征病毒,猪瘟病毒不发生交叉反应,具有良好的特异性和重复性;对15份疑似病料进行了检测.发现均为荧光定量PCR阳性,而常规PCR只能检测出6份阳性.结果表明,建立的实时荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可用于临床PRV感染的检测. |
| 关 键 词： | 猪伪狂犬病毒 SYBR-Green Ⅰ 实时荧光定量PCR 标准曲线 |
Development of SYBR-Green Ⅰ real-time quantitative PCR assay for detection of pseudorabies virus |
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| LI Ming-feng,WEI Zhan-yong,GUO Xian-po,JIA Yan-yan,CHEN Hong-ying,WANG Xue-bing,CUI Bao-an.Development of SYBR-Green Ⅰ real-time quantitative PCR assay for detection of pseudorabies virus[J].Journal of Henan Agricultural University,2009,43(3). | |
| Authors: | LI Ming-feng WEI Zhan-yong GUO Xian-po JIA Yan-yan CHEN Hong-ying WANG Xue-bing CUI Bao-an |
| Institution: | 1.Engineering College of Animal Husbandry And Veterinary Science;Henan Agricultural University;Zhengzhou 450002;China;2.Henan Animal Food Safety Key Labrotorary;China |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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