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多重RT-PCR检测PRRSV和CSFV及PRRSV ORF5基因遗传变异分析
引用本文:张金强,吴家强,孟斌,郭文龙,王希辉,李坤,于江,刘少宁,张玉玉,王金宝.多重RT-PCR检测PRRSV和CSFV及PRRSV ORF5基因遗传变异分析[J].中国兽医学报,2011,31(5).
作者姓名:张金强  吴家强  孟斌  郭文龙  王希辉  李坤  于江  刘少宁  张玉玉  王金宝
作者单位:1. 山东省农业科学院畜牧兽医研究所,山东济南250100;山东农业大学动物科技学院,山东泰安271000
2. 山东省农业科学院畜牧兽医研究所,山东济南,250100
3. 山东农业大学动物科技学院,山东泰安,271000
基金项目:山东省自然科学基金重点资助项目,山东省重大科技专项资助项目,山东省农科院青年基金资助项目
摘    要:根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪瘟病毒(CSFV)的基因组序列设计了2对特异性引物,建立了同时检测PRRSV和CSFV的多重RT-PCR方法.2008年1月至2009年12月期间,采集山东各地71个不同规模猪场及农村散养户212份病料,采用建立的多重RT-PCR技术同时检测PRRSV和CSFV的感染状况.检测结果显示,病料中高致病性PRRSV占57.1%(121/212),CSFV占29.2%(62/212).应用RT-PCR方法扩增山东不同地区16株PRRSV的ORF5基因,并进行了序列分析.结果表明,16株PRRSV的ORF5基因核苷酸同源性为97.0%~100.0%;与参考变异毒株JXA1、传统毒株VR2332核苷酸同源性分别为98.0%~99.5%和86.4%~87.7%.推导的氨基酸序列分析表明,16株毒株GP5蛋白氨基酸不存在缺失,但存在位点突变.12株在非中和表位29位点与准种进化34位点发生了突变,分别由V→A和N→S;1株在非中和表位185位点发生突变,由A→V;这与2007年流行的PRRSV毒株JXA1、HUN等不同.

关 键 词:猪繁殖与呼吸综合征病毒  猪瘟病毒  多重PCR  ORF5基因

Detection of PRRSV and CSFV using M-PCR and genetic variation of PRRSV ORF5 gene
ZHANG Jin-qiang,WU Jia-qiang,MENG Bin,GUO Wen-long,WANG Xi-hui,LI Kun,YU Jiang,LIU Shao-ning,ZHANG Yu-yu,WANG Jin-bao.Detection of PRRSV and CSFV using M-PCR and genetic variation of PRRSV ORF5 gene[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2011,31(5).
Authors:ZHANG Jin-qiang  WU Jia-qiang  MENG Bin  GUO Wen-long  WANG Xi-hui  LI Kun  YU Jiang  LIU Shao-ning  ZHANG Yu-yu  WANG Jin-bao
Abstract:
Keywords:
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