| 大肠杆菌多重耐药调控基因evgS的克隆及其原核表达 |
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| 引用本文： | 刘树明,马红霞,陈立芳,刘玉堂.大肠杆菌多重耐药调控基因evgS的克隆及其原核表达[J].中国兽医学报,2011,31(3). |
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| 作者姓名： | 刘树明 马红霞 陈立芳 刘玉堂 |
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| 作者单位： | 吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春,130118 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，吉林省科技厅项目，吉林省教育厅项目 |
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| 摘 要： | 以大肠杆菌ATCC25922的基因组为模板,根据GenBank中大肠杆菌的evgS基因序列设计引物,PCR扩增出约894 bp的基因片段,将所得片段与pMD18-T simple vector连接,转化至大肠杆菌JM109中,筛选阳性克隆,其质粒中插入序列测序结果与GenBank中报道一致.提取阳性克隆质粒,经EcoR Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切,回收目的片段,定向克隆到pET-28a原核表达载体中,提取阳性质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,获得阳性克隆.经IPTG诱导阳性菌,收集表达产物,通过SDS-PAGE分析证实,pET-28a-evgS可成功地在大肠杆菌中表达EvgS蛋白.Western-blot检测证明,表达产物具有良好的反应原性.
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| 关 键 词： | 大肠杆菌 evgS基因 克隆 原核表达 |
Cloning and prokaryotic expression of multi-drug resistant regulator evgS gene of Escherichia coli |
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| LIU Shu-ming,MA Hong-xia,CHENG Li-fang,LIU Yu-tang.Cloning and prokaryotic expression of multi-drug resistant regulator evgS gene of Escherichia coli[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2011,31(3). |
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| Authors: | LIU Shu-ming MA Hong-xia CHENG Li-fang LIU Yu-tang |
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