| 基因Ⅶ型新城疫病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立 |
| |
| 引用本文： | 孟春春,段云兵,仇旭升,金仕强,詹媛,张向乐,于圣青,丁铲.基因Ⅶ型新城疫病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立[J].中国兽医寄生虫病,2011,19(5):8-14. |
| |
| 作者姓名： | 孟春春 段云兵 仇旭升 金仕强 詹媛 张向乐 于圣青 丁铲 |
| |
| 作者单位： | 1. 中国农业科学院上海兽医研究所,上海,200241
2. 南京农业大学动物医学院,南京,210095
3. 四川农业大学动物医学院,雅安,625014 |
| |
| 基金项目： | 农业公益性行业科研专项课题，国家高科技研究发展计划863计划 |
| |
| 摘 要： | 根据Ⅶ型新城疫病毒基质蛋白基因保守序列设计并合成特异性引物,建立快速检测Ⅶ型新城疫病毒的实时荧光定量RT-PCR方法。通过RT-PCR方法克隆Ⅶ型新城疫病毒M基因靶序列,并将其连入T-Easy载体,制备阳性标准品,优化反应条件,以10倍系列稀释的标准品绘制标准曲线,其相关系数为0.999。检测结果显示,该方法的灵敏度可达100 copies/μL,而且特异性良好,除Ⅶ型新城疫病毒外,对Ⅱ型/Ⅲ型/IV型/Ⅸ型新城疫病毒、H5亚型禽流感病毒、H9亚型禽流感病毒、鸡传染性支气管炎病毒检测结果均为阴性。本研究所建立的检测方法重复性好,批内和批间变异系数均小于5%。对40份实验感染样品的检测结果表明,其检出率为95%,而常规RT-PCR方法检出率仅为70%,表明该方法比常规RT-PCR检测方法灵敏度更高、特异性更强。
|
| 关 键 词： | Ⅶ型新城疫病毒 SYBR Green Ⅰ 实时荧光定量RT-PCR |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
|
