鳜脑组织细胞系的建立及其病毒敏感性研究 |
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作者姓名: | 罗晓雯 曾令兵 江南 艾桃山 范玉顶 李波 谢德兵 孟彦 周勇 |
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作者单位: | 中国水产科学研究院长江水产研究所 湖北 武汉 430223;武汉市农业科学院 湖北 武汉 430065 |
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摘 要: | 鱼类细胞是开展鱼类病毒分离鉴定、功能基因分析以及生物制品制备等研究的重要物质基础。鳜(Siniperca chuatsi)是深受养殖者和消费者欢迎的养殖品种。随着鳜鱼养殖产量的逐年增加,其病害问题尤其是病毒病问题也日趋严重,但是,可用于鳜鱼病毒分离和基因功能分析的鳜细胞系缺乏。本研究采用组织块消化法,对来源鳜脑组织的细胞进行原代培养,建立了鳜脑组织细胞系,命名为MFB。MFB细胞在28℃含10%胎牛血清的L-15中已稳定传代超过70次,第25代鳜脑组织细胞的染色体众数为56。采用免疫荧光细胞化学技术(β-tubulin和Neu-N)鉴定MFB细胞的神经元纯度,结果显示,培养的MFB细胞为神经元类细胞。病毒敏感性实验结果显示,鳜蛙虹彩病毒(MFRaIV)、大口黑鲈蛙虹彩病毒(LMBRaIV)和大鲵虹彩病毒(GSIV)均可在MFB细胞中产生典型细胞病变效应,病毒滴度分别为108.68±0.12、108.36±0.15、1010.15±1.85 TCID50/mL。使用脂质体Lipofectamine®2000将pEGFP-N1转入MFB细胞,转染效率可达20%。本研究建立的鳜脑组织细胞系不仅对多种蛙虹彩病毒敏感,而且转染质粒效率较高,为鳜病毒性病原的分离及基因功能研究奠定了前期基础。
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关 键 词: | 鳜 脑组织 细胞系 生物学特性 病毒敏感性 |
收稿时间: | 2021/10/21 0:00:00 |
修稿时间: | 2021/10/29 0:00:00 |
Establishment of a cell line derived from the brain tissue of madanrin fish Siniperca chuatsi and its susceptibility to infection by fish viruses |
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Authors: | LUO Xiaowen ZENG Lingbing JIANG Nan AI Taoshan FAN Yuding LI Bo XIE Debing MENG Yan ZHOU Yong |
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Institution: | Yangtze River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Wuhan, Hubei 430223, China;Wuhan Academy of Agricultural Sciences, Wuhan, Hubei 430065, China |
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Abstract: | |
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Keywords: | Mandarin fish Siniperca chuatsi Brain tissue Cell line Biological characteristics Viral susceptibility |
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