| 转GFP基因核移植牛胚胎的研究 |
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| 引用本文： | 邓守龙,吕自力,王亮,王安江,曹文广.转GFP基因核移植牛胚胎的研究[J].中国畜牧兽医,2009,36(8):73-78. |
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| 作者姓名： | 邓守龙 吕自力 王亮 王安江 曹文广 |
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| 作者单位： | (1.新疆农业大学动物科学学院， 乌鲁木齐 830052； 2.新疆金牛生物有限公司， 乌鲁木齐 830026； 3.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所， 北京 100193； 4.中国科学院新疆理化技术研究所， 乌鲁木齐 830011) |
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| 摘 要： | 试验采用脂质体转染法与电穿孔法，以携带绿色荧光蛋白（GFP）-新霉抗性（neo-）双标记基因的pMSCV质粒转染胎牛耳成纤维细胞为供体与体外成熟的牛卵母细胞为受体构建克隆胚。研究了体外成熟培养液中添加EGF（表皮生长因子）对转基因胚的影响，不同转染方法构建供体细胞对重构胚发育的影响和在不同体外培养系统中的发育效果。结果显示，体外成熟培养液中添加EGF 30 ng/mL组的卵母细胞成熟率最高，但对后期转基因重构胚的囊胚发育率的影响，以添加EGF 20 ng/mL组的最高；以胎牛耳成纤维细胞为供体细胞，不同转染方法转染供体细胞构建重构胚，其囊胚发育率差异不显著（P>〖JP2〗0.05）；mSOFaa+颗粒细胞单层细胞共培养体系中的转基因囊胚发育率最好，该体系更适合体细胞核移植法生产转基因牛胚胎。
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| 关 键 词： | 牛 转基因 供体细胞转染 体外培养 |
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