| 非洲猪瘟病毒p30二聚体鉴定及胶体金免疫层析方法建立 |
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| 引用本文： | 张胜楠,周雅维,张子羿,单玉平,夏晓莉,张鑫宇.非洲猪瘟病毒p30二聚体鉴定及胶体金免疫层析方法建立[J].扬州大学学报(农业与生命科学版),2023(6):77-83. |
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| 作者姓名： | 张胜楠 周雅维 张子羿 单玉平 夏晓莉 张鑫宇 |
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| 作者单位： | 1. 扬州大学兽医学院;3. 上海容晖生物科技有限公司;4. 连云港市畜牧兽医站 |
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| 基金项目： | 国家“十四五”重点研发项目(2021YFD1801202)；;上海市“科技创新行动计划”农业科技领域项目(20392002700)； |
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| 摘 要： | 为建立一种制备简单、灵敏度高的非洲猪瘟病毒(ASFV)抗原快速检测方法，利用双表达载体pIRES在293A细胞上表达带有His标签和Flag标签的p30重组蛋白，裂解细胞后，通过免疫共沉淀发现p30重组蛋白以聚合体形式存在，进一步用质谱方法对原核系统表达纯化的p30重组蛋白进行分子量测定，结果证实，ASFV p30能自发形成二聚体。在此基础上，用抗p30的单克隆抗体6H9A10建立了单一单克隆抗体夹心检测p30二聚体的胶体金免疫层析方法，该方法对p30重组抗原最低检测浓度为2.1 ng·mL-1,对PRV、CSFV、PRRSV、PCV-2、PEDV、PPV、SVA等抗原检测结果均为阴性；用该胶体金免疫层析方法检测已知的100份临床样品，其中包含20份ASFV阴性血清、20份ASFV阴性组织、10份ASFV阴性血浆、21份ASFV阳性血清、21份ASFV阳性组织、8份ASFV阳性血浆，结果显示，检测出的48份阴性样品和49份阳性样品与已知结果一致。综上，建立的单个单克隆抗体夹心检测p30的胶体金免疫层析方法具有良好的特异性和敏感性，有望用于ASFV抗原的临床快速检测...
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| 关 键 词： | 非洲猪瘟病毒 p30 二聚体 胶体金免疫层析方法 |
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