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表达PEDV S蛋白重组仙台病毒的构建及其免疫原性研究
引用本文:邹静娴,孟慧,潘朔楠,陈振海,牟春晓.表达PEDV S蛋白重组仙台病毒的构建及其免疫原性研究[J].扬州大学学报(农业与生命科学版),2023(4):43-50+67.
作者姓名:邹静娴  孟慧  潘朔楠  陈振海  牟春晓
作者单位:1. 扬州大学兽医学院;2. 扬州大学江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心
基金项目:江苏省农业科技自主创新资金项目[CX(21)2014];;广西重点研发计划项目(桂科AB21238003);
摘    要:为构建表达猪流行性腹泻病毒(PEDV) S蛋白的重组仙台病毒(SeV),并评价其诱导的特异性免疫应答反应,利用PCR扩增得到PEDV中国流行株的全长S基因,构建含S基因的重组仙台病毒感染性克隆质粒(pBeloBAC-SeV-PEDV-S),并拯救重组病毒SeV-PEDV-S。对重组病毒进行鉴定并测定其生长曲线以确定成功获得表达PEDV S蛋白的重组仙台病毒。将表达S蛋白的仙台病毒免疫小鼠;间接免疫荧光和Western blot试验检测血清中特异性抗体的产生;利用脾脏淋巴细胞分离和流式细胞技术检测特异性T淋巴细胞增殖反应;对血清中的中和抗体效价进行评价。结果表明:重组仙台病毒能特异性表达PEDV S蛋白,且与野生型仙台病毒有一致的生长曲线;免疫小鼠后,重组仙台病毒能有效刺激小鼠产生特异性抗体,诱导较高的中和抗体水平,且能显著促进PEDV特异性T淋巴细胞增殖。综上,该试验为进一步研究重组仙台病毒在猪体上的免疫反应奠定了基础,也为新一代安全有效的PEDV活载体疫苗的研发提供了策略。

关 键 词:猪流行性腹泻  S蛋白  重组仙台病毒  免疫原性
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