| 利用CRISPR/Cas9技术敲除青花菜BoSP11创制自交亲和系 |
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| 引用本文： | 马存发,武婷,赵辉,张天培,赵立坚,余永辉,肖建成,李军,巫水钦.利用CRISPR/Cas9技术敲除青花菜BoSP11创制自交亲和系[J].园艺学报,2024(3):509-519. |
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| 作者姓名： | 马存发 武婷 赵辉 张天培 赵立坚 余永辉 肖建成 李军 巫水钦 |
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| 作者单位： | 1. 浙江美之奥种业股份有限公司;2. 嘉兴职业技术学院现代农业学院 |
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| 基金项目： | 浙江省蔬菜新品种选育重大科技专项（2021C02065-4-1）； |
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| 摘 要： | 通过CRISPR/Cas9技术敲除SRK基因或者SP11基因可以直接将甘蓝类蔬菜自交不亲和材料改造成自交亲和材料。本研究中根据全基因组重测序获得青花菜(Brassica oleracea var.italic) BoSP11基因序列,构建双靶位点的CRISPR/Cas9基因编辑载体,利用农杆菌介导的遗传转化法对BoSP11进行敲除。结果显示,获得的29株转基因植株中有23株发生基因突变,编辑效率为79.3%。TA克隆测序结果表明有4株为纯合突变,19株为杂合突变。统计纯合突变T0代自交结籽情况发现花期自交亲和指数高达6.82,为目前所报道的能获得的亲和性最高指数。T1代植株在隔离大棚中通过蜜蜂授粉平均单株采收种子24.8 g,完全实现不需要人工干预完成亲本材料的自交繁育。
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| 关 键 词： | 青花菜 甘蓝 CRISPR/Cas9 基因编辑 BoSP11 自交亲和系 |
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